化工儀器網(wǎng)
資料下載
如何鑒定子癇前期大鼠胎盤模型中的自然殺傷細(xì)胞
閱讀：197 發(fā)布時間：2018-10-171、介紹
多年來，大鼠已經(jīng)成為了學(xué)術(shù)界和產(chǎn)業(yè)界廣泛采用的重要臨床前動物模型系統(tǒng)。使用大鼠進(jìn)行研究的一個重要方面就是生殖。子癇前期是一種會對大多數(shù)懷孕造成影響的疾病，它是一種因孕婦出現(xiàn)高血壓而引起的并發(fā)癥。子癇前期通常與慢性炎癥相關(guān)，而且還會危及孕婦和胎兒的生命。選用妊娠大鼠模型來研究胎盤的免疫反應(yīng)，有助于我們了解子癇前期，而我們研究的終目的是研發(fā)出一種治療方法，以完善這種嚴(yán)重疾病的發(fā)病機(jī)制。在本文中，我們對大鼠胎盤中存在的自然殺傷細(xì)胞進(jìn)行了表征。
2、材料與方法
采用無痛致死術(shù)將大鼠于妊娠 19 天處死，并摘取胎盤。從胎盤中獲取單細(xì)胞懸液。4℃ 孵育細(xì)胞 30 分鐘，添加或不添加抗體，以自然殺傷細(xì)胞標(biāo)記物 ANK61 抗體進(jìn)行標(biāo)記。隨后，400 g 離心 5 分鐘，將上述兩種情況下得到的細(xì)胞洗滌 3 次，并將其放在 4℃ 避光條件下，用二抗 5-FITC 孵育 30 分鐘。后，將這些細(xì)胞洗滌 3 次，并重懸于含有 50% 福爾馬林的 RPMI 中。使用 CytoFLEX* 流式細(xì)胞儀對這些細(xì)胞進(jìn)行分析。分析結(jié)果顯示，陽性染色細(xì)胞的百分比大于陰性對照組。
3、試劑
ANK61 小鼠抗大鼠單克隆純化抗體 / Abcamab36392。
山羊抗小鼠 FITC / Abcam ab6785。
4、數(shù)據(jù)分析
FSC-A x SSC-A 活性設(shè)門
圖 1. 山羊抗小鼠二抗 FITC（藍(lán)色）與 ANK61 小鼠抗大鼠一抗山羊抗小鼠 二抗 FITC（綠色）的疊加直方圖。
5、結(jié)果
本文利用 CytoFLEX 流式細(xì)胞儀展示大鼠胎盤中被激活 NK 細(xì)胞出現(xiàn)增長的現(xiàn)象，促使我們能夠進(jìn)一步對胎盤中的免疫反應(yīng)進(jìn)行表征，從而進(jìn)一步實現(xiàn)了了解子癇前期病理生理學(xué)機(jī)制的終目的。
6、參考文獻(xiàn)
Amaral LM, Cunningham Jr MW, Cornelius DC, LaMarca B. Preeclampsia: long term consequences for vascular health.Vasc Health Risk Manag.2015 in press.
*本產(chǎn)品僅用于科研，不用于臨床診斷。
——————————————————————————————————————