化工儀器網(wǎng)
資料下載
大鼠骨骼肌衛(wèi)星細胞說明書
閱讀：244 發(fā)布時間：2018-9-12一、產(chǎn)品簡介
大鼠骨骼肌衛(wèi)星細胞說明書
1、產(chǎn)品名稱：大鼠骨骼肌衛(wèi)星細胞
2、組織來源：大鼠骨骼肌
3、產(chǎn)品規(guī)格：5×105 細胞/25cm2 培養(yǎng)瓶
4、細胞簡介： 骨骼肌衛(wèi)星細胞指骨骼肌中除骨骼肌纖維（肌細胞）外的一種扁平、有突起的細胞。其
附著于肌纖維
（肌細胞）表面；當肌纖維（肌細胞）受損后，肌衛(wèi)星細胞可增殖分化，參與肌纖維（肌細胞）的修復，
因此具有干細胞性質(zhì)。
本公司生產(chǎn)的大鼠骨骼肌衛(wèi)星細胞采用酶解法制備而來，細胞總量約為5×105/T25 方瓶，細胞純度可
達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)基信息：
我們推薦使用大鼠骨骼肌衛(wèi)星細胞*培養(yǎng)液（產(chǎn)品編號：KR5083-5）作為體外培養(yǎng)大鼠骨骼肌衛(wèi)星
細胞的培養(yǎng)基。
二、使用方法
1、您收到細胞后，請按照以下方法進行操作：
取出T-25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精擦拭培養(yǎng)瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2 細胞培養(yǎng)箱中靜置4-6
小時或過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)，然后換用新鮮*培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)或進行傳代。
2、細胞傳代：
1）細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄25cm2 培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS 清洗細胞一次；
2）添加0.125%胰蛋白酶消化液約2ml 至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入*
培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml 離心管中，1500rpm/min，離心
5min；
3）棄上清，沉淀細胞用12ml *培養(yǎng)基重懸，然后按1:2 比例進行分瓶傳代，后放入37℃，
5%CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4）待細胞*貼壁后，觀察培養(yǎng)結(jié)果，之后進行換液培養(yǎng)或傳代。
3、細胞凍存：
1）細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄25cm2 培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS 清洗細胞一次；
2）添加0.125%胰蛋白酶消化液約2ml 至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后輕輕吹打
細胞使之脫落，再加入*培養(yǎng)液終止消化，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml 離心管中，1500rpm/min，離心
5min；
3）用適當量的凍存液（基礎(chǔ)培養(yǎng)基：FBS：DMSO=7:2:1）重懸細胞，并放置于凍存管中；
4）先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃過夜，24h 后轉(zhuǎn)入液氮中進行長期保存。
4、細胞復蘇：
1）從液氮中取出細胞凍存管（注意：佩戴防爆管面具）， 快速將其置入37℃水浴中解凍，直至凍存
管中無結(jié)晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁；
2）將凍存管中的細胞移至15ml 無菌離心管中，滴加入*培養(yǎng)液5ml 混勻細胞，然后將細胞懸液轉(zhuǎn)
移至適當面積大小的培養(yǎng)皿中；
3）放置于37℃，5%CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4）第二天，換用新鮮*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
三、注意事項
1、培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6 個月；
2、在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作；
3、該細胞只可用于科研；