ALPCO前白蛋白ELISA是一種高靈敏度的雙位點(diǎn)酶聯(lián)免疫測(cè)定法（ELISA），用于測(cè)量小鼠血清和血漿樣本中的前白蛋白。僅供研究使用。不用于診斷程序。

艾美捷前白蛋白(小鼠)ELISA, 96孔（ALP-41-PALMS-E01）檢測(cè)原理：

在該測(cè)定中，樣品中存在的前白蛋白與吸附在聚苯乙烯微量滴定孔表面的抗前白蛋白抗體反應(yīng)。通過洗滌去除未結(jié)合的蛋白質(zhì)后，加入與辣根過氧化物酶（HRP）結(jié)合的抗前白蛋白抗體。這些酶標(biāo)記的抗體與之前結(jié)合的前白蛋白形成復(fù)合物。在另一個(gè)洗滌步驟之后，通過添加顯色底物3,3'，5,5'-四甲基聯(lián)苯胺（TMB）來測(cè)定與免疫吸附結(jié)合的酶。結(jié)合酶的量與被測(cè)樣品中前白蛋白的濃度直接相關(guān)；因此，450nm處的吸光度是測(cè)試樣品中前白蛋白濃度的量度。測(cè)試樣品中前白蛋白的量可以從標(biāo)準(zhǔn)品構(gòu)建的標(biāo)準(zhǔn)曲線中插值，并根據(jù)樣品稀釋進(jìn)行校正。

前白蛋白(小鼠)ELISA, 96孔試劑盒組分：

試劑盒及其組分的有效期在盒標(biāo)簽上標(biāo)明。如果按照本試劑盒協(xié)議插入存儲(chǔ)和使用，所有組分在有效期前都是穩(wěn)定的。

程序局限性：

當(dāng)按照試劑盒說明書中的信息w全理解并遵循良好的實(shí)驗(yàn)室操作實(shí)踐進(jìn)行測(cè)定程序時(shí)，將獲得可靠和可重復(fù)的結(jié)果?？赡苡绊憸y(cè)定性能的因素包括適當(dāng)?shù)膬x器功能、玻璃器皿的清潔度、蒸餾水或去離子水的質(zhì)量、試劑和樣本移液的準(zhǔn)確性、洗滌技術(shù)、孵育時(shí)間或溫度。不要將不同批次或來源的試劑混合或替換。

樣本收集和處理：

所有血液成分和生物材料應(yīng)被視為潛在的危險(xiǎn)物質(zhì)。在處理和處置時(shí)遵循通用預(yù)防措施。如果血液樣本出現(xiàn)凝血、嚴(yán)重溶血、脂血，或者對(duì)樣本的完整性有疑慮，請(qǐng)做好記錄并謹(jǐn)慎解釋結(jié)果。下面列出的樣本收集和儲(chǔ)存條件是作為一般指導(dǎo)。尚未評(píng)估樣本的穩(wěn)定性。

- 血清樣本 - 應(yīng)通過靜脈穿刺收集血液。血液凝固后，通過離心分離血清。取出血清立即進(jìn)行測(cè)定或分裝后將樣本儲(chǔ)存在-80°C（最好）或-20°C。避免重復(fù)凍融循環(huán)。

- 血漿樣本 - 應(yīng)將血液收集到含有抗凝劑的容器中，然后進(jìn)行離心。立即進(jìn)行測(cè)定或分裝后將樣本儲(chǔ)存在-80°C（最好）或-20°C。避免重復(fù)凍融循環(huán)。

- 已知干擾物質(zhì) - 濃度高于0.1%的疊氮化物和硫柳汞會(huì)抑制酶反應(yīng)。

結(jié)果計(jì)算：

1. 從每個(gè)孔的測(cè)試值中減去平均背景值（標(biāo)準(zhǔn)零的平均吸光度讀數(shù)）。

2. 對(duì)每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的平均重復(fù)讀數(shù)取平均值，并使用這些結(jié)果構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線。通過使用能夠生成四參數(shù)邏輯曲線擬合的計(jì)算機(jī)軟件來減少數(shù)據(jù)，構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線。也可以使用二階多項(xiàng)式（二次）或其他曲線擬合；然而，它們對(duì)數(shù)據(jù)的擬合將不夠精確。

3. 從標(biāo)準(zhǔn)曲線中插值測(cè)試樣本值。校正稀釋因子，以得出原始樣本中的前白蛋白濃度。

附錄A - 參考血清信息：

本試劑盒包含一瓶參考血清。請(qǐng)參閱隨附的產(chǎn)品概況表以獲取特定批次的信息。請(qǐng)注意以下事項(xiàng)：

1. 收到參考血清后應(yīng)將其冷凍。如果儲(chǔ)存得當(dāng)，它在有效期前都是穩(wěn)定的。

2. 應(yīng)適當(dāng)稀釋參考血清，以適應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)范圍曲線。

3. 有關(guān)稀釋樣本的說明，請(qǐng)參考協(xié)議中的“樣本稀釋"部分。

4. 在移液樣本（程序部分）時(shí)，也應(yīng)雙重移液參考血清。