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使用安捷倫液相色譜柱前要了解什么？
閱讀：840 發(fā)布時間：2020-3-24
在安捷倫液相色譜柱使用前要仔細閱讀色譜柱附帶的說明書，注意適用范圍，如pH值范圍、流動相類型等;必須使用保護柱;色譜柱長時間不用時，柱內(nèi)應(yīng)充滿溶劑，兩端封死保存。
溶劑瓶中的沙芯過濾頭容易破碎，在更換流動相時注意保護，當(dāng)發(fā)現(xiàn)過濾頭變臟或長菌時，不可用超聲洗滌，可用35%稀硝酸溶液浸泡后再洗滌。
流動相使用前必須過濾，不要使用多日存放的蒸餾水。
檢測器的燈有使用壽命限制，一般在正式進樣分析前30min左右開啟D燈或W燈，分析結(jié)束，立即關(guān)燈。儀器運行時，泵頭必須用10%異丙醇水溶液虹吸沖洗，不能干涸。
注意各流動相所剩溶液的容積設(shè)定，若設(shè)定的容積低于zui低限會自動停泵。
對于手動進樣器當(dāng)使用緩沖溶液時要用水沖洗進樣口同時搬動進樣閥數(shù)次每次數(shù)毫升
若使用含鹽流動相，開機時必須先用10%甲醇水溶液沖洗20分鐘以上再換上含鹽流動相。
在使用安捷倫液相色譜柱之前，還要先了解樣品和雜質(zhì)的類型結(jié)構(gòu)、極性、酸堿性、分子量大小等相關(guān)內(nèi)容。
樣品是極性的且弱酸性的；就可以選擇C18在100%酸性水溶液條件下檢測，即要選擇承受100%純水且對極性化合物保留很好的色譜柱。如果樣品極性太強，或酸性太強；可以選擇CN，NH2，或硅膠柱，也有使用C18+強陰離子對試劑或強陰離子交換色譜柱，缺點是離子對試劑平衡時間長，對流動相pH要求比較精密，否則很難重復(fù)實驗，另外離子對試劑很難洗下來，基本上用了離子對的色譜柱就不能再用于其它實驗。
如果樣品是堿性的；可選擇高純硅膠柱（高純硅膠缺少金屬雜質(zhì)，且硅膠端基封尾）或一些經(jīng)過修飾的C18柱（如極性嵌入技術(shù)或堿去活技術(shù)等），他們都會減少堿性化合物的拖尾，一般會選擇中性或偏堿的條件下做，因為這樣可增加堿性樣品的保留。
如果堿性化合物的酸性太強，或堿性太強；可以選擇寬pH的C18色譜柱在高pH值檢測（優(yōu)點是方法開發(fā)簡單，缺點是目前實現(xiàn)這一技術(shù)的色譜柱品牌比較少，價格也高）或者選用HILIC色譜柱，選擇強離子交換柱，也有使用C18+強陰離子對試劑或強陰離子交換色譜柱。