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            技術文章

            人DNA修復基因XRCC1ELISA檢測試劑盒?操作步驟

            閱讀:296          發(fā)布時間:2021-9-28

            人DNA修復基因XRCC1ELISA檢測試劑盒操作步驟:


            1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標準品100μl,然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

            2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

            3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

            4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

            5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

            6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

            7. 溫育:操作同3。

            8. 洗滌:操作同5。

            9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

            10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

            11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘。

            BALB/C小鼠肝瘤株;BNL 1ME A.7R.1

            小鼠黑色素瘤細胞;B16-F1

            小鼠T淋巴瘤細胞(雞OVA基因修飾);E.G7-OVA

            小鼠骨髓瘤細胞;P3/NSI/1-Ag4-1

            小鼠B細胞雜交瘤細胞;W6/32

            雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7B5

            雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7E7

            小鼠樹突狀細胞肉瘤低轉移細胞(綠色熒光蛋白標記);DG6-GFP

            小鼠樹突狀細胞肉瘤低轉移細胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過表達);DG6-VAP33-GFP

            小鼠胚胎成纖維細胞(HNP抗性);HNP MEF(CF-1)

            小鼠結締組織L細胞株929克隆;L-929 [L929]

            小鼠肺腺癌低轉移細胞(綠色熒光蛋白標記);LA1-GFP

            小鼠肺腺癌低轉移細胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過表達);LA1-VAP33-GFP

            小鼠前胃癌低轉移細胞(綠色熒光蛋白標記);MFC-B5-GFP

            C57BL/6小鼠T細胞淋巴瘤細胞;RMA

            小鼠腹水瘤細胞;S-180

            雜交瘤(B類);IB3C10H12A12G2H8F3

            雜交瘤(B類);Z1510A2G6A2F8

            雜交瘤(B類);Z1510C6D10F4G6

            雜交瘤(B類);Z153A2A5B3A12

            小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-A2

            小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-A4

            小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-A5

            小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-B1

            小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-B2

            小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-B4

            小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-B5

            小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-B6

            小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-C2

            小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-C4

            小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-D2

            小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-D3

            tTA基因修飾的小鼠睪丸畸胎瘤細胞(B類);F9-CAG-tTA-1A3

            tTA基因修飾的小鼠睪丸畸胎瘤細胞(B類);F9-CAG-tTA-3A1

            tTA基因修飾的小鼠睪丸畸胎瘤細胞(B類);F9-CAG-tTA-3E5

            tTA基因修飾的小鼠睪丸畸胎瘤細胞(B類);F9-CAG-tTA-4D6

            tTA基因修飾的小鼠睪丸畸胎瘤細胞(B類);P19-CAG-tTA-1D3

            tTA基因修飾的小鼠睪丸畸胎瘤細胞(B類);P19-CAG-tTA-1F3

            tTA基因修飾的小鼠睪丸畸胎瘤細胞(B類);P19-CAG-tTA-3C3

            tTA基因修飾的小鼠睪丸畸胎瘤細胞(B類);P19-CAG-tTA-3C8


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