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            技術(shù)文章

            腺病毒B型探針法熒光定量PCR試劑盒樣品要求及注意事項

            閱讀:349          發(fā)布時間:2021-3-9

            腺病毒B型探針法熒光定量PCR試劑盒樣品要求及注意事項:

            1、 如果提供實驗材料,實驗材料必須保證新鮮,請您采樣后立刻放入液氮中速凍或加入樣穩(wěn)定劑,并用干冰運輸。
            2、 如果樣品可以用Trigol法提總RNA ,也可以將樣品研磨后放在 Trigol中,動植物組織 : 50~100mg/mlTrigol,貼壁細(xì)胞:10cm2/mlTrigol,懸浮細(xì)胞:5×106動植物,酵母細(xì)胞或細(xì)菌細(xì)胞10×107/mlTrigol。
            3、 如果提供RNA或cDNA我們要對您提供的材料進(jìn)行評估。
            4、 實時熒光定量PCR服務(wù)您一定要提供樣品及要擴(kuò)增基因的詳細(xì)信息。

            實驗規(guī)則:

            1、要保證移液槍的準(zhǔn)確性,誤差不能超過2%??捎盟碗娮犹炱竭M(jìn)行確定。但有專業(yè)人員進(jìn)行矯正。
            2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時。
            3、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定。
            4、實驗時,要使底物避光保存。
            5、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
            6、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
            7、將液體加到酶標(biāo)孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。
            8、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動功能。
            9、應(yīng)盡量做雙孔實驗,這樣才能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。
            10、對結(jié)果有疑問的樣品要用其它方法進(jìn)行確證。

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