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            轉(zhuǎn)化細(xì)胞復(fù)蘇如何去保存呢?

            閱讀:122          發(fā)布時(shí)間:2018-4-3

            1、凍存轉(zhuǎn)化細(xì)胞從液氮中取出后,立即放入37℃水浴中,輕輕搖動冷凍管,使其在1分鐘內(nèi)全部融化(不要超過3分鐘)。

            2、解凍后的細(xì)胞可直接接種到含*生長培養(yǎng)液的細(xì)胞培養(yǎng)瓶中直接進(jìn)行培養(yǎng),24小時(shí)后再用新鮮*培養(yǎng)液替換舊培養(yǎng)液,以去除DMSO。

            3、如果細(xì)胞對冷凍保護(hù)劑特別敏感,解凍后的細(xì)胞應(yīng)先通過離心去除冷凍保護(hù)劑,然后再接種到含*生長培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶中。

            如果知道細(xì)胞的凍存那么就必定聽說過細(xì)胞復(fù)蘇實(shí)驗(yàn)。今日詳談細(xì)胞復(fù)蘇,整理實(shí)驗(yàn)保存。實(shí)驗(yàn)步驟一共是五個(gè),保存的方法是三個(gè)。下面就來看看為您整理出的實(shí)驗(yàn)步驟與保存方法。

            按照順序來,首先就是實(shí)驗(yàn)步驟,一共是五個(gè):

            1、從液氮容器中取出凍存管,直接浸入37℃溫水中,并不時(shí)搖動令其盡快融化。

            2、從37℃水浴中取出凍存管,打開蓋子,用吸管吸出細(xì)胞懸液,加到離心管并滴加10倍以上培養(yǎng)液,混勻。

            3、離心,1000rpm,5min。

            4、棄去上清液,加入含10%小牛血清培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,計(jì)數(shù),調(diào)整細(xì)胞密度,接種培養(yǎng)瓶,37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)。

            5、轉(zhuǎn)化細(xì)胞次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)。
            HPLC含量測定    洛伐他汀    對照品    100600-200502        100mg
            HPLC含量測定    辛伐他汀    對照品    100601-200502        100mg
            含量測定     厄多司坦    對照品    100602-200301        50mg
            含量測定     萘哌地爾    對照品    100606-200301        50mg
            含量測定    厄貝沙坦    對照品    100607-200301        50mg
            含量測定    奧硝唑    對照品    100608-200301        100mg
            HPLC法含量測定    氯雷他定    對照品    100615-200401        100mg
            HPLC法檢查    3,4,5-*氧基苯甲酸    對照品    100617-200501        50mg
            HPLC法含量測定用    鹽酸吉西他濱    對照品    100622-200401        50mg
            轉(zhuǎn)化細(xì)胞

             

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