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            你知道DNA提取純化流程有哪些嗎?讓我們一起來(lái)看看吧!

            時(shí)間:2023-11-21 閱讀:1357
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              DNA提取純化流程
              你知道DNA提取純化流程有哪些嗎?讓我們一起來(lái)看看吧!
              一、樣本采集與保存
              1.新鮮:新鮮樣本中受到內(nèi)源性核酸酶影響相對(duì)最小,得到DNA質(zhì)量相對(duì)更好。
              2.適量:投入過(guò)多樣本,后續(xù)樣本裂解不充分從而影響DNA提取情況,還會(huì)引入過(guò)多雜質(zhì)及內(nèi)源性核酸酶。
              3.不同類型的樣本在采集與保存時(shí)也會(huì)存在差異
              4.植物組織保存時(shí)間:對(duì)于含有多糖多酚等次生代謝產(chǎn)物的衰老葉片可在4℃黑暗環(huán)境下饑餓1-2天;進(jìn)行低溫或冷凍保存可以避免內(nèi)源性DNA酶對(duì)樣本中的DNA進(jìn)行一個(gè)降解。
              5.動(dòng)物組織保存時(shí)間:-20℃短期保存(1-3個(gè)月),-70℃長(zhǎng)期保存;福爾馬林固定時(shí)間8-24h內(nèi)為宜,樣本存放時(shí)間不宜超過(guò)1年;FFPE樣本保存溫度4℃,建議不超過(guò)3年。
              二、樣本處理方式
              1.動(dòng)物組織:液氮研磨或勻漿。
              2.植物組織:液氮研磨(最推薦),研磨充分又保證樣本處于低溫條件下避免DNA降解。
              3.哺乳動(dòng)物血液樣本:DNA存在于含有細(xì)胞核的白細(xì)胞中,而大量存在的紅細(xì)胞會(huì)引入更多雜質(zhì)和核酸酶,所以需要提前使用紅細(xì)胞裂解液對(duì)紅細(xì)胞進(jìn)行去除。
              4.細(xì)胞樣本:貼壁細(xì)胞胰酶消化處理再做收集,懸浮細(xì)胞只要離心棄上清。
              5.細(xì)菌樣本:溶菌酶破壁處理,如金黃色葡萄球菌加入一定量的溶菌酶在37℃條件下孵育30min就可完成破壁的處理。
              6.真菌樣本:酶解破壁或液氮凍融或超聲裂解法。
              7.FFPE樣本:脫蠟處理(二甲苯或礦物油類的物質(zhì)進(jìn)行脫蠟處理)。
              更多有關(guān)DNA提取純化流程,請(qǐng)聯(lián)系北京百奧創(chuàng)新科技有限公司。

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