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            草地夜蛾卵巢細(xì)胞;Sf9操作步驟

            閱讀:413          發(fā)布時(shí)間:2021-8-3

            草地夜蛾卵巢細(xì)胞;Sf9操作步驟:

            1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。

            2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

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            mOPC, 小鼠少突膠質(zhì)前體細(xì)胞

            MA, 小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞

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            mRTEC, 小鼠腎小管上皮細(xì)胞

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            MN-c, 小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元

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            人絨毛膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞

             正常細(xì)胞

            NRK-52E,大鼠腎細(xì)胞

            H9c2大鼠心肌細(xì)胞(ATCC來源)

            C2C12, 小鼠肌原細(xì)胞

            NIH/3T3, 小鼠成纖維細(xì)胞系

            大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)

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