化工儀器網(wǎng)
技術(shù)文章
elisa酶聯(lián)免疫試劑盒價(jià)格基因差別表達(dá)和差異顯示技術(shù)概述
閱讀：451 發(fā)布時(shí)間：2018-2-101、elisa酶聯(lián)免疫試劑盒價(jià)格基本原理
真核生物中，從個(gè)體的生長(zhǎng)、發(fā)育、衰老、死亡，到組織的得分華、調(diào)亡以及細(xì)胞對(duì)各種生物、理化因子的應(yīng)答，本質(zhì)上都涉及基因的選擇性表達(dá)。高等生物大約有30 000個(gè)不同的基因，但在生物體內(nèi)任意8細(xì)胞中只有10%的基因的以表達(dá)，而這些基因的表達(dá)式安事件和空間順序有序地進(jìn)行著，這種表達(dá)的方式即為基因的差異表達(dá)。其包括新出現(xiàn)的基因的表達(dá)與表達(dá)量有差異的基因的表達(dá)。生物體表現(xiàn)出的各種特性，主要是由于基因的差異表達(dá)引起的。
2、基本方法與步驟簡(jiǎn)述
差別雜交（differential hybridization）又叫差別篩選（differential screening），適用于分離經(jīng)特殊處理而被誘發(fā)表達(dá)的mRNA的cDNA克隆。為了增加這種方法的有效性，后來又發(fā)展出了扣除雜交（subtractive hybridization）技術(shù)?？鄢s交又叫扣除cDNA克?。╯ubtractive cDNA cloning），它是通過構(gòu)建扣除文庫(kù)（subtractive library）得以實(shí)現(xiàn)的。
差別雜交的技術(shù)基礎(chǔ)十分簡(jiǎn)單，它不需要任何有關(guān)的目的基因的核苷酸序列信息，而重要的是耍擁有兩種不同的細(xì)胞群體：在一個(gè)細(xì)胞群體中目的基因正常表達(dá)，在另一個(gè)細(xì)胞群體中目的基因不表達(dá)。在這種情況下便可制備到兩種不同的mRNA提取物。其一是含有一定比例的目的基因mRNA種的總mRNA群體，其二是不含有目的基因mRNA種的總mRNA群體。因此，可以通過這兩種總mRNA（或是它們的cDNA拷貝）為探針的平行雜交，對(duì)由表達(dá)目的基因的細(xì)胞總mRNA構(gòu)建的克隆庫(kù)進(jìn)行篩選。當(dāng)使用存在目的基因的mRNA探針時(shí)，所有包含著重組體的菌落都呈陽(yáng)性反應(yīng)，在x光底片上呈現(xiàn)黑色斑點(diǎn)，而使用不存在目的基因的mRNA探針時(shí)，除了含有目的基因的菌落外，其余的所有菌落都呈陽(yáng)性反應(yīng)，在x光底片上呈現(xiàn)黑色斑點(diǎn)。比較這兩種底片井對(duì)照原平板，便可以挑選出含目的基因的菌落，供作進(jìn)一步研究使用。
扣除雜交法的本質(zhì)是除去那些普遍共同存在的、或是非誘發(fā)產(chǎn)生的cDNA序列，從而elisa酶聯(lián)免疫試劑盒價(jià)格使欲分離的目的基因的序列得到有效的富集，提高了分離的敏感性。下面以T細(xì)胞受體（T-cellreceptor，TCR有時(shí)亦稱之為T細(xì)胞抗原受體）編碼基因的分離為例子，說明扣除雜交篩選法的基本原理與簡(jiǎn)要過程。T細(xì)胞和B細(xì)胞來自共同的前體細(xì)胞，兩者都能夠識(shí)別特異的抗原。但與B細(xì)胞不同，T細(xì)胞不能識(shí)別游離的抗原，而只能識(shí)別展現(xiàn)在其它。
Maleic Acid 110-16-7 300mg 馬來酸標(biāo)準(zhǔn)品
Malic Acid 6915-15-7 500mg 蘋果酸標(biāo)準(zhǔn)品
Maltitol 585-88-6 200mg 麥芽糖醇標(biāo)準(zhǔn)品
Maltol 118-71-8 4g 麥芽酚標(biāo)準(zhǔn)品
Maltose Monohydrate 6363-53-7 500mg 麥芽糖標(biāo)準(zhǔn)品
m-Aminoglutethimide 100mg m-氨魯米特標(biāo)準(zhǔn)品
m-Aminophenol 591-27-5 300mg 間氨基苯酚標(biāo)準(zhǔn)品
Mandelic Acid (AS) 90-64-2 500mg 扁桃酸標(biāo)準(zhǔn)品
Mangafodipir Trisodium 140678-14-4 200mg 錳福地吡三鈉標(biāo)準(zhǔn)品
elisa酶聯(lián)免疫試劑盒價(jià)格