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            mRNA合成全流程產品解決方案

            閱讀:1054      發(fā)布時間:2023-6-12
            分享:

            SARS-CoV-2(coronavirus disease 2019)疫情暴發(fā)以來,各個國家采取了多種控制措施,但仍造成了大量的感染和死亡病例。世界衛(wèi)生組織(World Health Organization,WHO)統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示,截至2023年2月3日,全球SARS-CoV-2累計確診病例7.54億例,死亡病例達到681萬例。目前,雖然我國已經解除對SARS-CoV-2采取的甲類傳染病管控措施,但是SARS-CoV-2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)仍然在變異,重復感染的風險仍然存在。疫苗接種和抗病藥物的使用是控制傳染病的有效手段。而疫苗被認為是全球戰(zhàn)勝SARS-CoV-2疫情的最終希望。

            自SARS-CoV-2疫情爆發(fā)以來,滅活疫苗、重組蛋白亞單位疫苗、病毒載體疫苗、DNA載體疫苗和mRNA疫苗等五大技術路線的過百個疫苗研發(fā)項目在全球緊急啟動。mRNA疫苗相比于其他類型的疫苗,具有安全性高、生產成本低、生產周期短,能更好滿足全球疫情對疫苗劑量的迫切需求以及易于開發(fā)針對變異病毒株新疫苗等優(yōu)勢,已在全球掀起了研發(fā)高潮。據(jù)統(tǒng)計,我國大約有16款mRNA SARS-CoV-2在研。疫情退去,后續(xù)上市的疫苗還能獲得多大的商業(yè)化價值尚未可知,但布局mRNA疫苗是一個入場mRNA療法這一新興領域的重要步驟。


            mRNA疫苗/藥物的工作機制清晰,經由脂質納米顆粒包裹的mRNA進入體內后被細胞所攝取,納米脂質顆粒在胞內解開后釋放出mRNA,隨后利用體內的氨基酸進行自然的蛋白翻譯,從而發(fā)揮其藥物/疫苗功能。mRNA的體外合成制備、保持穩(wěn)定性和細胞內遞送是mRNA藥物/疫苗研發(fā)的關鍵技術。


            圖1 mRNA疫苗/藥物原理

             

            其中合成LNP包裹的mRNA流程大致經過模板制備、體外轉錄、純化和載體包裹等環(huán)節(jié):


            圖2 LNP-mRNA合成流程


            圖3 mRNA合成產品總覽(酶法加帽法)

             

            一、模板制備:

            貨號

            產品名稱

            規(guī)格

            abs60251

            重組高熱穩(wěn)定DNA 聚合酶

            1000U

            abs44058811

            dNTP Mix (25 mM each)

            250ul

            abs60036

            2×Taq PCR Mix

            1ml*50

            abs60034

            2× Xerox PCR Master Mix

            1ml×5

            abs60056

            2×Pfu Master Mix

            1ml×5

            abs60055

            2×Pfu Master Mix(Quick Load)

            1ml×5

             abs60084

            T4 DNA Ligase

            500U×10

            abs60250

            快速多片段DNA組裝預混液

            50T

            abs60024

            無內毒素高純度質粒大量快速提取試劑盒

            10T

            abs60023

            無內毒素高純度質粒小量快速提取試劑盒

            50T

             


            二、體外轉錄:

            分類

            貨號

            產品名稱

            規(guī)格

            酶產品

            abs60153

            T7 RNA 聚合酶

            1000KU

            abs60170

            無機焦磷酸酶

            100KU

            abs60172

            脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase Ⅰ)

            10000U

            abs60249

            重組表達的鼠源RNase抑制劑

            10000U

            abs60150

            RNA酶抑制劑

            40000U

            核苷酸原料

            abs60159

            ATP Sodium salt solution(100 mM)

            1ml×3

            abs60163

            CTP Sodium salt solution(100 mM)

            1ml×3

            abs60164

            GTP Sodium salt solution(100 mM)

            1ml×3

            abs60165

            UTP Sodium salt solution(100mM)

            1ml×3

            修飾堿基

            abs60155

            假尿苷三磷酸四鈉鹽溶液

            1ml

            abs60156

            N1-甲基-假尿苷三磷酸四鈉鹽溶液

            1ml

            abs60168

            5-甲基-CTP鈉鹽溶液

            1ml

            abs60169

            5-甲氧基-UTP鈉鹽溶液

            1ml

            abs60185

            假尿苷三磷酸四鋰鹽溶液

            50ul

            abs60186

            N1-甲基-假尿苷三磷酸四鋰鹽溶液

            50ul

            abs60187

            N6-甲基-ATP鋰鹽溶液

            50ul

            abs60188

            5-甲基-CTP鋰鹽溶液

            50ul

            abs60189

            5-甲氧基-UTP鋰鹽溶液

            50ul

             

            三、RNA加帽(酶法加帽法)

            分類

            貨號

            產品名稱

            規(guī)格

            酶產品

            abs60153

            T7 RNA 聚合酶

            1000KU

            abs60166

            2 氧甲基轉移酶

            50000U

            abs60152

            牛痘病毒加帽酶

            10000KU

             

             

             

             

            合成帽結構

            abs60182

            Abs Cap AG

            100ul

            abs60183

            Abs Cap GG

            100ul

            abs60184

            Abs Cap AU

            100ul

            abs60318

            Abs Cap m6AG

            10ul

            abs60319

            Abs Cap2 AG

            10ul

            abs60320

            Abs Cap2 m6AG

            10ul

            abs60321

            體內天然帽結構類似物組合

            1kit

             

            四、RNA純化及檢測

            分類

            貨號

            產品名稱

            規(guī)格

            RNA純化

            abs9259

            無酶無菌水(DEPC水)

            500ml

            abs7992

            Oligo(dT)18磁珠(1um)

            1ml

            abs7986

            羧基磁珠(1um)

            10ml

            雙鏈RNA 檢測

            abs590002

            雙鏈RNA(dsRNA)ELISA檢測試劑盒(K1)

            96T

             

            五、mRNA相關其他品推薦

            貨號

            產品名稱

            規(guī)格

            產品特征

            abs60174

            Cas9 mRNA

            100ug×10

            新鮮現(xiàn)貨

            abs60190

            Cas9 nickase mRNA

            100ug×10

            新鮮現(xiàn)貨

            abs60176

            EGFP mRNA

            100ug×10

            新鮮現(xiàn)貨

            abs60178

            Fluc mRNA

            100ug×10

            新鮮現(xiàn)貨

            abs60180

            mcherry mRNA

            100ug×10

            新鮮現(xiàn)貨

            abs60192

            EBFP mRNA

            100ug×10

            新鮮現(xiàn)貨

            abs60193

            ECFP mRNA

            100ug×10

            新鮮現(xiàn)貨

            abs60195

            mBanana mRNA

            100ug×10

            新鮮現(xiàn)貨

            abs60196

            mHoneydew mRNA

            100ug×10

            新鮮現(xiàn)貨

            abs60197

            mKate mRNA

            100ug×10

            新鮮現(xiàn)貨

            abs60198

            mOrange mRNA

            100ug×10

            新鮮現(xiàn)貨

            abs60199

            mPlum mRNA

            100ug×10

            新鮮現(xiàn)貨

            abs60311

            mtangerine mRNA

            100ug×10

            新鮮現(xiàn)貨

            abs60313

            tdTomato mRNA

            100ug×10

            新鮮現(xiàn)貨

            abs60314

            YFP mRNA

            100ug×10

            新鮮現(xiàn)貨

            abs60191

            Cre mRNA

            100ug×10

            新鮮現(xiàn)貨

            abs60194

            EPO mRNA

            100ug×10

            新鮮現(xiàn)貨

            abs60312

            OVA mRNA

            100ug×10

            新鮮現(xiàn)貨

            abs60315

            β-gal mRNA

            100ug×10

            新鮮現(xiàn)貨

            abs60332

            Endless  eGFP mRNA

            50ug

            新鮮現(xiàn)貨

            abs60333

            Endless  Fluc  mRNA

            50ug

            新鮮現(xiàn)貨

            abs60334

            Endless  mcherry mRNA

            50ug

            新鮮現(xiàn)貨

            abs60335

            Endless  Cas9 mRNA

            50ug

            新鮮現(xiàn)貨

            abs60336

            Endless  EPO mRNA

            50ug

            新鮮現(xiàn)貨

            備注:所有工具RNA均使用 Cap AG結構共轉錄加帽,修飾堿基5種可任選其一(5-Methoxy-UTP,5-Methyl-CTP,N1-Methylpseudo-UTP,N6-Methyl-ATP,Pseudo-UTP。)

             





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