在細胞培養(yǎng)過程中，也經(jīng)常會對細胞進行凍存操作。細胞凍存通常是指將細胞放在低溫環(huán)境，減少細胞代謝，以便長期儲存的一種技術(shù)。細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。
細胞凍存液，作為細胞凍存時必須使用的一種溶液，不僅僅是說只是用來進行細胞的保存，在細胞的購買、寄贈、交換和運送過程中也起著關(guān)鍵作用，因此選擇一款好的細胞凍存液就尤為重要。
如果不加任何條件直接凍存細胞，細胞內(nèi)和外環(huán)境中的水都會形成冰晶，能導(dǎo)致細胞內(nèi)發(fā)生機械損傷、電解質(zhì)升高、滲透壓改變、脫水、pH值改變、蛋白變性等，從而引起細胞死亡。而細胞凍存液就相當(dāng)于細胞的保護劑，在凍存細胞時將細胞懸浮于凍存液中，可使冰點降低，提高細胞膜對水的通透性，在緩慢的凍結(jié)條件下，能使細胞內(nèi)水份在凍結(jié)前透出細胞，可以防止或減少冷凍冰晶對細胞的損傷作用。這樣就使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來，在需要時直接復(fù)蘇就可恢復(fù)細胞活性。
傳統(tǒng)細胞凍存液
傳統(tǒng)的細胞凍存液是使用培養(yǎng)基、血清和DMSO按照一定的比例混合，其中DMSO的含量是10%，血清的含量是10%，統(tǒng)稱為含血清細胞凍存液。
含血清細胞凍存液的一般的凍存方法是梯度降溫凍存法，
如先將冷凍管置于4℃冰箱10分鐘，然后移至-20℃冰箱30分鐘，再移至-80℃冰箱保存16-18個小時(或隔夜)，最后才移至液氮罐中進行長期的儲存。
(其中需要注意的是-20℃條件下不可超過1個小時，以防止冰晶過大，造成細胞大量的死亡。)
無血清細胞凍存液
無血清細胞凍存液，不含血清，含DMSO、葡萄糖等各種細胞營養(yǎng)成分、pH調(diào)節(jié)劑等成分。不含動物來源性蛋白，能減少各類病毒、霉菌和支原體等污染，確保凍存細胞安全。通用于各種動物細胞株。2-8℃即可穩(wěn)定保存，無需冷凍，即取即用。凍存細胞，無需程序降溫。凍存細胞復(fù)蘇率在90%以上。
用途
1.無血清細胞凍存液用于造血干細胞、間充質(zhì)干細胞等干細胞的儲存。
2.無血清細胞凍存液用于T淋巴細胞、NK細胞等免疫細胞的存儲。
3.無血清細胞凍存液用于其他類型哺乳動物細胞的儲存。
產(chǎn)品性能
1.不含牛血清，無動物源組分。
傳統(tǒng)的凍存液，一般由胎牛血清、DMSO等組分組成。胎牛血清取自牛，因此，難以應(yīng)用到需要避免接觸動物源的應(yīng)用領(lǐng)域。用包括人白蛋白等蛋白組分替代血清的用途，無動物源組分。
2.2-8℃即可穩(wěn)定保存，無需冷凍，即取即用。
為了避免反復(fù)凍融，傳統(tǒng)的細胞凍存液，需要分裝成小管后置于-20℃環(huán)境下保存。細胞沉淀加無血清細胞凍存液，直接放入-80℃長期儲存即可，無需再進行分裝。
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