細(xì)胞治療是用具有活性細(xì)胞制劑為主要成分來(lái)治療或預(yù)防疾病的技術(shù)，細(xì)胞治療領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)是干細(xì)胞和免疫細(xì)胞，應(yīng)用這些技術(shù)，需要遵照相應(yīng)的法律、法規(guī)與行政管理規(guī)定，其細(xì)胞來(lái)源、生產(chǎn)工藝和臨床應(yīng)用過(guò)程進(jìn)行污染物的監(jiān)控與檢測(cè)。
當(dāng)細(xì)胞受到支原體污染初期，通常難以觀察到細(xì)胞的生長(zhǎng)和形態(tài)方面的明顯變化。然而，如果支原體污染嚴(yán)重，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)速度減緩，并在細(xì)胞之間形成膜片狀的附著結(jié)構(gòu)。此外，支原體的存在會(huì)抑制宿主細(xì)胞的核酸蛋白合成，影響細(xì)胞內(nèi)一些重要酶和細(xì)胞因子的正常功能。這些影響最終會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞增殖受到抑制，甚至停止，導(dǎo)致細(xì)胞碎片逐漸增多，最終導(dǎo)致細(xì)胞死亡。
不僅如此，如果細(xì)胞或者細(xì)胞產(chǎn)物被支原體污染，一旦此類(lèi)藥物用于臨床，將造成不可挽回的后果。因此，在細(xì)胞治療項(xiàng)目中，需要對(duì)是否存在支原體污染進(jìn)行檢測(cè)。常用的方法為qPCR的方法。
支原體熒光定量PCR法（qPCR）：是在常規(guī)PCR基礎(chǔ)上，將『針對(duì)支原體特異性保守序列的探針』做熒光標(biāo)記，使PCR擴(kuò)增后的產(chǎn)物帶有熒光，利用熒光信號(hào)的變化和配套軟件，進(jìn)行DNA擴(kuò)增反應(yīng)的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)，簡(jiǎn)稱(chēng)qPCR。該方法的優(yōu)點(diǎn)：
①靈敏度高、特異性強(qiáng)。
②時(shí)間短，2-3小時(shí)出結(jié)果
③檢測(cè)結(jié)果可定量
④操作簡(jiǎn)便
德國(guó)MB公司生產(chǎn)的支原體qPCR檢測(cè)試劑盒（均為探針?lè)z測(cè)），依據(jù)操作步驟的細(xì)微差別， 分『經(jīng)典法』和『一步法』兩種。
此兩類(lèi)試劑盒較全球其他廠家同類(lèi)產(chǎn)品，具有以下優(yōu)點(diǎn)：
①經(jīng)典法qPCR試劑盒遵循歐洲藥典流程要求
②高特異性，一次檢測(cè)即可涵蓋了所有可能感染細(xì)胞的支原體物種（涵蓋歐洲藥典規(guī)定的9種支原體），根據(jù)序列一致性，至少可以檢測(cè)到107種支原體物種。操作簡(jiǎn)單，易于觀察（使用MB的試劑盒，下表中列出的支原體物種均為陽(yáng)性，其他微生物或真核細(xì)胞均為陰性，無(wú)交叉反應(yīng)）。
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