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            土壤蔗糖酶(S-SC)操作流程

            時間:2021/7/12閱讀:359
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            土壤蔗糖酶(S-SC)操作流程:

            1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
            2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
            3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
            4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
            5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
            6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
            7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。

            樣本收集與前處理:
            血清(漿)可直接測定。
            紅細胞:需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
            動物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測定。
            培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織:常用PBS作為勻漿介質(zhì)破碎后離心取上清測定。

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