狠狠色丁香久久综合婷婷亚洲成人福利在线-欧美日韩在线观看免费-国产99久久久久久免费看-国产欧美在线一区二区三区-欧美精品一区二区三区免费观看-国内精品99亚洲免费高清

            上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
            中級(jí)會(huì)員 | 第10年

            15026555973

            ATCC細(xì)胞
            蛋白質(zhì)產(chǎn)品
            核酸擴(kuò)增產(chǎn)品
            elisa試劑盒
            生化試劑
            PCR試劑盒
            標(biāo)準(zhǔn)品
            PCR鑒定
            生化試劑盒
            科研細(xì)胞
            分子生物學(xué)試劑
            ELISA實(shí)驗(yàn)檢測(cè)
            蛋白
            抗體

            轉(zhuǎn)化細(xì)胞常用純化方法

            時(shí)間:2017-9-8閱讀:97
            分享:

              轉(zhuǎn)化細(xì)胞人工純化是利用人為手段造成對(duì)某一細(xì)胞生長(zhǎng)有利的環(huán)境條件,抑制其他細(xì)胞的生長(zhǎng)從而達(dá)到純化細(xì)胞的目的。
            1、細(xì)胞時(shí)間差酶消化法:
            酶消化法是比較常用的純化方法,不僅對(duì)貼壁細(xì)胞可行,能利用上皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞對(duì)胰蛋白酶的耐受性不同,是兩者分開(kāi),達(dá)到純化的目的;另外對(duì)貼壁細(xì)胞與半貼壁細(xì)胞及黏附細(xì)胞間的分離純化也是十分有效的。
            兩者在胰蛋白酶的作用下,由于成纖維細(xì)胞先脫壁,而上皮細(xì)胞要消化相當(dāng)長(zhǎng)的時(shí)間才脫壁,特別是在原代細(xì)胞初次傳代和早期傳代中兩種差別尤為明顯,故可采用多次差別消化方法將上皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞分開(kāi),方法步驟如下:
            采用常規(guī)消化傳代方式將0.25%胰蛋白酶注入培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)兩次,每次加1ml(25ml培養(yǎng)瓶),來(lái)回輕搖1-2次,使胰蛋白酶流過(guò)所有細(xì)胞表面,然后倒掉。
            蓋好瓶塞,將培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下觀察,發(fā)現(xiàn)成纖維細(xì)胞變園,部分脫落,立即加入2ml有血清的培養(yǎng)基終止消化。
            用彎頭吸管輕輕吹打成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)區(qū)域(可事先在鏡下用記號(hào)筆在培養(yǎng)瓶上劃出記號(hào))。吹打時(shí)不要用力,也不要吹打上皮細(xì)胞生長(zhǎng)區(qū)域。吹打結(jié)束后,再用少量培養(yǎng)基漂洗一遍,然后加入適量培養(yǎng)基于瓶?jī)?nèi)繼續(xù)培養(yǎng),也可重復(fù)上述操作再進(jìn)行一次。
            隔幾日后或下次傳代時(shí),再進(jìn)行上述操作,進(jìn)過(guò)幾次處理,就可將成纖維細(xì)胞去除或者將兩者分開(kāi)。
            2、細(xì)胞培養(yǎng)機(jī)械刮除法:
            原代培養(yǎng)時(shí),如果上皮轉(zhuǎn)化細(xì)胞和成纖維細(xì)胞分為區(qū)成混雜生長(zhǎng),每種細(xì)胞都以小片或區(qū)域性分布的方式生長(zhǎng)在瓶壁上??刹捎脵C(jī)械的方法去除不需要的細(xì)胞區(qū)域而保留需要的細(xì)胞區(qū)域,其方法步驟如下 :
            將要純化細(xì)胞的培養(yǎng)瓶,在凈化室內(nèi)放在倒置顯微鏡監(jiān)視下進(jìn)行操作。
            用硅橡膠刮子在不需要生長(zhǎng)的細(xì)胞區(qū)域推劃,使細(xì)胞懸浮在培養(yǎng)基中,注意不要傷及所需細(xì)胞。
            推劃后用培養(yǎng)基沖洗振搖兩次倒掉,即可將培養(yǎng)基加入原瓶繼續(xù)培養(yǎng)。
            數(shù)日后如發(fā)現(xiàn)不需要的細(xì)胞又長(zhǎng)出,可再進(jìn)行上述操作,這樣反復(fù)多次可以純化細(xì)胞。操作過(guò)程中要嚴(yán)格無(wú)菌操作,防止污染。
            ≥98%    規(guī)格:        *:    Curcumol    莪術(shù)醇    
            ≥98%    規(guī)格:        *:    (+)-Catechin    兒茶素    
            ≥96%    規(guī)格:        *:    Dihydrotanshinone I    二氫丹參酮 I    
            ≥95%    規(guī)格:        *:    Dihydrocapsaicin    二氫辣椒堿    
            ≥99%    規(guī)格:        *:    Dihidromethysticin    二氫麻醉椒苦素    
            ≥97%    規(guī)格:        *:    Columbianadin    二氫歐山芹醇當(dāng)歸酸酯    
            ≥98%    規(guī)格:        *:    Dihydrolycorine    二氫石蒜堿  
            轉(zhuǎn)化細(xì)胞 

             

            會(huì)員登錄

            ×

            請(qǐng)輸入賬號(hào)

            請(qǐng)輸入密碼

            =

            請(qǐng)輸驗(yàn)證碼

            收藏該商鋪

            X
            該信息已收藏!
            標(biāo)簽:
            保存成功

            (空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)

            常用:

            提示

            X
            您的留言已提交成功!我們將在第一時(shí)間回復(fù)您~
            撥打電話(huà)
            在線(xiàn)留言