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微生物的污染干細胞方式
(1)空氣:空氣微生物傳播的zui主要途徑。如果培養(yǎng)操作場地與外界隔離不嚴或消毒不充分,外界不潔空氣很容易侵入造成污染。現(xiàn)實驗室普遍使用凈化工作臺,能產(chǎn)生過濾無菌的屏障氣流,可有效防止不潔空氣的進入。但凈化工作臺使用過久,濾器受塵埃阻塞,可使凈化工作不能正常進行。工作時不帶口罩或面對操作野大聲講話、咳嗦等使外界氣流過強,污染空氣可進入操作野,造成污染。因此工作時減少空氣流動是防止污染的重要環(huán)節(jié)。培養(yǎng)設施不能設在通風場所,一般培養(yǎng)是環(huán)境中每立方米含菌不應該超過1-5個。
(2)器材:各種培養(yǎng)皿器及器械清洗消毒不*。污物殘留及培養(yǎng)用液等滅菌不*都可以引入有害物質(zhì)。另外需要注意的是CO2溫箱。由于溫箱內(nèi)濕度大,溫度適宜,存取干細胞不慎將培養(yǎng)液漏出,易使細菌霉菌孳生,而CO2開方式培養(yǎng),如不定期消毒可形成污染。
(3)操作:實驗操作無菌觀念不強、動作不準確,使用污染的器具,或封瓶不嚴多可發(fā)生污染,培養(yǎng)兩種以上細胞時,操作不規(guī)范。交叉使用吸管或培養(yǎng)液瓶等有可能導致細胞的交叉感染。
(4)血清:有些血清在時就已被支原體或病毒等污染,即可成為污染的來源。
(5)組織樣本:原代培養(yǎng)的污染多數(shù)來源于組織樣本;另一方面手術時使用碘酒消毒,這些混入組織中的碘酒也可以影響干細胞生長。
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