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能量來(lái)源每一個(gè)生長(zhǎng)培養(yǎng)基都需要碳源,以供細(xì)胞新陳代謝。碳源通常是葡萄糖,但也可以是其他糖類(lèi),如半乳糖、己糖、果糖或其他碳源(如丙酮酸,谷氨酰胺)。葡萄糖通常以終濃度為5.5mM的含量添加,大約等于人體...
可能原因:1細(xì)胞崩解了;2培養(yǎng)基可能污染了,取部分培養(yǎng)基進(jìn)行檢菌試驗(yàn)細(xì)胞培養(yǎng)中常見(jiàn)的生物污染類(lèi)型有7種,分別是細(xì)菌污染、支原體污染、原蟲(chóng)污染、黑膠蟲(chóng)污染、真菌污染、病毒污染以及非細(xì)胞污染.他們?cè)诩?xì)胞培...
1.細(xì)胞庫(kù)之細(xì)胞培養(yǎng)基不加抗生素1.1.培養(yǎng)自ATCC引進(jìn)之細(xì)胞株,培養(yǎng)基中不加抗生素1.2.培養(yǎng)自其它實(shí)驗(yàn)室引進(jìn)之細(xì)胞株,制作tokenfreeze前培養(yǎng)基須添加抗生素,待tokenfreeze通過(guò)...
大部分elisa檢測(cè)均以血清為標(biāo)本。血清標(biāo)本可按慣例方法收集,應(yīng)留意防止溶血,紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為符號(hào)的ELISA測(cè)定中,溶血標(biāo)本可能會(huì)添加非特異性顯色。血清標(biāo)本宜...
干細(xì)胞治療也被稱(chēng)為再生醫(yī)學(xué),是指利用干細(xì)胞及其衍生物來(lái)促進(jìn)受損、病變或功能喪失的組織進(jìn)行修復(fù)。如今,許多白血病等患者已經(jīng)受益于干細(xì)胞治療。未來(lái),骨關(guān)節(jié)炎、腦癱、心臟衰竭、多發(fā)性硬化癥、甚至是聽(tīng)力損失等...
(1)單獨(dú)沖洗,防止交叉反應(yīng)造成污染。臨床上每天檢測(cè)的病例很多,所用的抗體種類(lèi)及項(xiàng)目也多,如果在加入一抗孵育完后,將它們?cè)谝粋€(gè)缸內(nèi)洗,這樣就會(huì)造成交叉污染,影響最后的結(jié)果。正確的做法是單獨(dú)地進(jìn)行沖洗,...
PBS是磷酸緩沖鹽溶液一般作為溶劑,起溶解保護(hù)試劑的作用。它是生物化學(xué)研究中使用廣泛的一種緩沖液,主要成分為Na?HPO?、KH?PO?、NaCl和KCl。PBS緩沖液不僅偽狂犬病毒要用它稀釋?zhuān)话愕?..
必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃,使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化,避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶,對(duì)細(xì)胞造成損害。細(xì)胞復(fù)蘇步驟一.實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:將水浴鍋預(yù)熱至37℃。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行...
牛血清白蛋白(BSA),是牛血清中的一種球蛋白,包含607個(gè)氨基酸殘基,分子量為66.446KDa,等電點(diǎn)為4.7。牛血清白蛋白在生化實(shí)驗(yàn)中有廣泛的應(yīng)用。主要成分:1.蛋白質(zhì)——是牛血清中主要成份。除...
原代細(xì)胞是通過(guò)一定的方法如酶法或機(jī)械法或生長(zhǎng)法使細(xì)胞從人體和動(dòng)物的母體器官、組織或液體中分離出來(lái),并在受控環(huán)境條件下分離的細(xì)胞在體外或其他人體和動(dòng)物體內(nèi)生長(zhǎng)。原代細(xì)胞的提取方法詳細(xì)步驟:1)整個(gè)操作要...
在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)這樣或那樣的問(wèn)題,這些問(wèn)題從細(xì)胞生長(zhǎng)角度來(lái)說(shuō),針對(duì)細(xì)胞不貼壁、生長(zhǎng)緩慢、生長(zhǎng)不好,甚至死亡的原因,我們做以下分析并提出相對(duì)應(yīng)的解決方法。一、培養(yǎng)細(xì)胞不貼壁可能原因:胰蛋白酶消化過(guò)...
血清被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)達(dá)幾十年之久。動(dòng)物血清主要包括胎牛血清、小牛血清、成牛血清、馬血清、羊血清、雞血清、兔血清等,其中以胎牛血清的使用z為普遍。動(dòng)物血清在細(xì)胞培養(yǎng)中提供細(xì)胞增殖所需的生長(zhǎng)因子、激素...
一、我們先來(lái)說(shuō)說(shuō)何為緩凍:緩凍即為凍存細(xì)胞時(shí),要程序降溫——4℃30min,-20℃1h,-80℃過(guò)夜,次日投入液氮內(nèi)。二、那為什么要進(jìn)行緩凍呢?其實(shí)所謂的緩凍是一般使用傳統(tǒng)凍存液凍存過(guò)程中需要程序降...
1、透析血清分子量小于10,000的分子如氨基酸、葡萄糖、鹽離子和未結(jié)合的蛋白均被移除。透析血清主要用在進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)成分優(yōu)化和標(biāo)定特定成分進(jìn)行研究的實(shí)驗(yàn)中。2、碳吸附血清使用活性和右旋糖苷去除血清中的親脂...
胎牛血清通常在細(xì)胞培養(yǎng)中作為基礎(chǔ)生長(zhǎng)培養(yǎng)基的添加劑,在細(xì)胞培養(yǎng)中,血清供應(yīng)了豐富的高分子蛋白,低分子量營(yíng)養(yǎng)物,疏水載體蛋白和其他體外細(xì)胞生長(zhǎng)必要的成分如激素和粘附因子。同時(shí),胎牛血清可以增加培養(yǎng)基的緩...
牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成份,常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。一、血清的成分血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部...
細(xì)胞培養(yǎng)基是人工模擬細(xì)胞在體內(nèi)生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,是提供細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的物質(zhì)基礎(chǔ)。培養(yǎng)液或培養(yǎng)基的含義幾乎相同,英文都是medium。當(dāng)它是粉劑時(shí),傾向性地稱(chēng)為培養(yǎng)基,而將粉劑配成液體后,多稱(chēng)...
細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢的常見(jiàn)原因:(1)培養(yǎng)基可能缺乏細(xì)胞生長(zhǎng)所需的某種因子。通常情況下,當(dāng)小伙伴購(gòu)買(mǎi)細(xì)胞,并沒(méi)有按照ATCC或國(guó)內(nèi)細(xì)胞庫(kù)推薦的方法制備培養(yǎng)基,使用實(shí)驗(yàn)室兄弟姐妹使用的培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。解決方法...
1.支原體污染的普遍性支原體污染是細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域遇到的性問(wèn)題,據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道,綜合美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局(FDA)、美國(guó)模式菌種收集中心(ATCC)等機(jī)構(gòu)收到的相關(guān)數(shù)據(jù),世界各國(guó)細(xì)胞系支原體污染的平均比例為...
ELISA即酶聯(lián)吸附試驗(yàn),是一種常用的固相酶免疫測(cè)定方法。Engvall和Perlmann于1971年先應(yīng)用該法進(jìn)行了IgG定量測(cè)定,并命名為"enzymelinkedimmunosorbentass...
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