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★CQ★raw264.7細(xì)胞復(fù)蘇:
將液氮中細(xì)胞直接放入37℃左右水浴中快速解凍,后加入5倍體積培養(yǎng)基,800rpm離心3min,轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。成功率基本上99.9%
★CQ★raw264.7細(xì)胞培養(yǎng):
1)培養(yǎng)條件:1640+10%FBS、5%CO2、37°C;
2)這細(xì)胞對(duì)刺激很敏感,不用胰酶消化,盡量不用雙抗;傳代的時(shí)候盡量吹散,防止扎堆,也不能吹太過(guò),吹太過(guò),細(xì)胞會(huì)受到刺激易張觸角;
3)raw264.7細(xì)胞對(duì)PH也比較敏感,偏堿性的時(shí)候容易扎堆,培養(yǎng)基用久了偏堿性的時(shí)候要注意調(diào)一下;
4)細(xì)胞生長(zhǎng)較快,建議一天傳一次代。
★CQ★raw264.7細(xì)胞凍存:
凍存液為50%血清,10%DMSO,40%培養(yǎng)基,放入凍存盒后4℃、30min,直接轉(zhuǎn)入-80℃,過(guò)夜后轉(zhuǎn)入液氮。
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