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            蒂科(上海)生物科技有限公司

            YMB-1細(xì)胞處理方法YMB-1細(xì)胞

            時(shí)間:2017-1-13閱讀:1710

            以下細(xì)胞處理方法及細(xì)胞說明書僅供參考,具體操作還需要根據(jù)到貨時(shí)細(xì)胞密度,細(xì)胞生長狀態(tài)等具體情況,酌情處理,如需要更詳細(xì)技術(shù)指導(dǎo),請(qǐng)及時(shí)或郵件。

            需要特別指出的是:如細(xì)胞出現(xiàn)問題,請(qǐng)于48h內(nèi)及時(shí)反饋,本公司將竭誠為您服務(wù)!

            一.貼壁細(xì)胞

            1. 客戶接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。

            2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。

            3. 顯微鏡觀察細(xì)胞,當(dāng)細(xì)胞融匯至80%左右(可以傳代的情況下),細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱預(yù)溫1-2h后再做處理。如未達(dá)到細(xì)胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。

            4. 嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

            5. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。

            6. 用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,加入適量的0.05%胰酶-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。

            7. 1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2  培養(yǎng)。

            二.懸浮細(xì)胞

            1. 接收到細(xì)胞,用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)培養(yǎng)瓶外部。

            2. 肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X ,200X 各一張)。

            3. 嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。

            4. 將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒)。

            5. 1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。 換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和新鮮培養(yǎng)基,37℃,5%CO2  培養(yǎng)。

            三.一毫升小管操作方法  小管內(nèi)也是此細(xì)胞。

            1. 用75%的酒精消毒(建議配制75%酒精的水是滅菌過的)。

            2. 嚴(yán)格無菌操作,用吸管吸出管中細(xì)胞至9ml*培養(yǎng)基混勻。

            3. 1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。

            4.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2  培養(yǎng)。

            J774A.1

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