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產品描述
李記生物的細胞/病毒裂解試劑盒（10×Lysis Buffer）是一種比較強烈的細胞/病毒裂解液，主要成分為Tris-HCl、SDS以及Tween-20、EDTA等。裂解液裂解得到的核酸樣品可以用于常規(guī)的PCR、qPCR、ddPCR等。
本產品可以用于細胞/病毒樣品。
訂購信息
產品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 |
10×細胞/病毒裂解試劑盒（10×Lysis buffer） | AN19L050 | 1mL |
10×細胞/病毒裂解試劑盒（10×Lysis buffer） | AN19L051 | 2*1mL |
產品組分
組分 | AN19L050 | AN19L051 | 儲存條件 |
A. 10×裂解液 | 1 mL | 2*1 mL | -20℃ |
B. Proteinase K | 20 mg/mL | 20 mg/mL | 4℃或室溫 |
運輸與保存
藍冰運輸。組分A在-20℃保存，組分B在4℃或室溫保存，有效期12個月。
使用方法
1. 從冰箱中取出10×裂解液，置于室溫條件下溶解，渦旋混勻后待用。
2. 10×裂解混合液配制：裂解試劑的單位使用量見下表，可按實際用量的1.1倍配制混合液，根據實際樣本量（N），取相應體積的10×裂解液和Proteinase K（Proteinase K在使用前加入），渦旋振蕩混勻后使用。Proteinase K用量可根據實驗需要適當調整。
單位用量 | 實際用量（1.1×N） | |
10× Lysis Buffer（10*） | 1.8 | 1.98N |
Proteinase K | 0.2 | 0.22N |
3. 操作步驟
3.1 病毒樣本
取病毒溶液18μl和10×裂解液（含Proteinase K）混合液2μl，建議裂解條件如下，實際裂解條件可根據裂解體積作相應調整。
溫度 | 時間 | |
消化 | 68℃ | 15min |
滅活 | 98℃ | 3min |
3.2 細胞樣本
3.2.1 1×裂解液（含Proteinase K）配制
實驗前根據實際需要，使用PDB（和元生物貨號：RP004）或PBS，將步驟2配制好的10×裂解混合液，稀釋至1×裂解混合液。
3.2.2 樣本前處理
①貼壁細胞：去除培養(yǎng)液，用PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍，胰mei消化后離心收集細胞。
②懸浮細胞：400g離心5min收集細胞，輕輕渦旋振蕩或者彈擊管底以把細胞盡量分散開。
3.2.3 樣本裂解
按照＜1E7細胞量每孔加入100 μl的1×裂解液，渦旋振蕩15s充分裂解細胞，充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多，必需分裝成＜1E7細胞/管，然后再進行裂解。建議裂解條件如下，實際裂解條件可根據裂解體積作適當調整。
溫度 | 時間 | |
消化 | 55℃ | 60min |
滅活 | 95℃ | 15min |
4. 樣品充分裂解后稀釋10倍，可直接用于下游的PCR擴增。
注意事項
1. 本產品僅限于科學實驗研究使用，不得用于臨床診斷、治療等領域。
2. 為取得最佳的使用效果，盡量避免反復凍融，建議分裝后使用。
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