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凱氏定氮儀測定醫(yī)用膠原蛋白海綿中蛋白質(zhì)含量
閱讀：1456 發(fā)布時間：2020-7-6前言
膠原蛋白海綿是以牛跟腱為原材料，通過酶解、純化制取高純Ι型膠原，再根據(jù)互貫網(wǎng)絡(luò)技術(shù)制成。 膠原分子兼有修復(fù)、止血和填充三種作用，能夠激活內(nèi)源性凝血途徑，在使用時通過壓迫創(chuàng)面激活內(nèi)源性凝血，以達到止血效果。
實驗部分
1.1實驗原理
小麥中的有機態(tài)氮在濃硫酸和催化劑的共同作用下，轉(zhuǎn)化為氨態(tài)氮。加堿蒸餾，使氨析出，用硼酸吸收后，再以鹽酸或硫酸標準滴定液進行滴定。
1. 2 儀器與設(shè)備
K1160 全自動凱氏定氮儀
SH 420F 石墨消解儀
1. 3 試劑與耗材
實驗中涉及到的試劑，均為優(yōu)級純或分析純；實驗用水為無氨蒸餾水。
1.3.1 鹽酸或硫酸溶液：c(H + )= 0 . 1mol /L ，標準滴定液。
1. 3 . 2 硼酸溶液：質(zhì)量分數(shù) 2% 。
1. 3. 3 氫氧化鈉溶液：質(zhì)量分數(shù) 40% 。
1. 3. 4 溴甲酚綠 - 甲基紅混合指示劑：將溴甲
酚綠乙醇溶液 (1g/ L) 與甲基紅乙醇溶液(1g/ L) 按 5 ： 1 體積比臨時混合搖勻備用。
1. 3 . 5 催化劑片： 3g 硫酸鉀和 0. 2g 硫酸銅混合均勻壓片
1. 4 實驗過程
1 . 4 . 1 取樣
將樣品剪碎后，稱量0.01g 的樣品（至 0 . 1mg ），加硫酸鉀 0.3g 與硫酸銅 0 .02g ，再沿瓶壁滴加硫酸2mL 。
1 . 4 .2 消解
利用石墨消解爐進行消解，將消化管放在石墨爐上，蓋上排氣罩，連接廢氣吸收系統(tǒng)，設(shè)定消解溫度參數(shù)如下表：
消化完畢后，將消化管取下冷卻。
1 . 4 . 3 上機測試
待消化管內(nèi)溶液冷卻至室溫后，將消化管放置于定氮儀上，開始蒸餾滴定。定氮儀設(shè)置程序如下：
式中：M-標準酸摩爾濃度（mol/L)
W-樣品質(zhì)量（g）
V0-樣滴定標準酸消耗量（mL）
V-樣品滴定標準酸消耗量（mL）
5.79-樣品蛋白系數(shù)
結(jié)果與討論
