ELISA實(shí)驗(yàn)中顯色弱靈敏度低

在完成所有實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行底物TMB溶液顯色后，酶標(biāo)板中孔的顯色比較淺，即只有微弱的信號(hào)呈現(xiàn)。
出現(xiàn)該現(xiàn)象的可能原因：
產(chǎn)品過(guò)有效期，試劑沒(méi)有按規(guī)定進(jìn)行適當(dāng)?shù)谋４妗?br />試劑，標(biāo)準(zhǔn)品或者樣品在使用前沒(méi)有平衡到室溫。
少加了試劑的量或者加入試劑的稀釋比例不當(dāng)。
洗板或者加樣過(guò)程中，酶標(biāo)物受污染失活。
孵育時(shí)間和孵育溫度未達(dá)到實(shí)驗(yàn)要求。
洗滌液稀釋倍數(shù)不符合要求，洗板次數(shù)過(guò)多，洗板沖擊力過(guò)大，洗板浸泡時(shí)間過(guò)長(zhǎng)。
底物溶液TMB顯色時(shí)間太短。