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            行業(yè)產(chǎn)品

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            流式檢測 T 細(xì)胞增殖的技巧

            閱讀:2663        發(fā)布時間:2018/5/21
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            集中于 T 細(xì)胞的許多基礎(chǔ)和臨床免疫研究包括增殖測定,都是為了確定 T 細(xì)胞是否能夠在不同的體外或體內(nèi)條件下增殖。流式細(xì)胞儀術(shù)是測量 T 細(xì)胞增殖的理想方法,現(xiàn)在有一套染色產(chǎn)品,可以在現(xiàn)有的流式細(xì)胞儀染色板中加入增殖染料。與所有流式細(xì)胞術(shù)染色步驟一樣,一定要做一個預(yù)實驗確定染色試劑的用量和確定采集的細(xì)胞數(shù),在下一個 T 細(xì)胞實驗確定使用其中的一個染色方案來檢測細(xì)胞的增殖 。

            胞內(nèi)熒光染色:

            羧基熒光素二乙酸酯琥珀酰亞胺酯(CFSE)或類似的熒光染料是可以進入活細(xì)胞內(nèi)的。在增殖期間,隨著細(xì)胞分裂熒光染料的濃度也隨之稀釋,并且可以在流式細(xì)胞檢測分析時作為離散峰測量多次細(xì)胞分裂。當(dāng)您在預(yù)實驗中檢測這些染料時,需確保這些增殖染料不影響細(xì)胞活性或形態(tài)。

            流式檢測T1.jpg

            DNA 合成:

            細(xì)胞增殖還可以通過胸苷合成類似物 5-溴-2'-脫氧尿苷(BrdU)檢測細(xì)胞周期 S 期的 DNA 合成量來測定。通常在細(xì)胞培養(yǎng)中添加 BrdU 以確定體外增殖,并且使用抗 BrdU 的二抗與細(xì)胞內(nèi)因子結(jié)合來測量 BrdU 摻入。

            流式檢測T2.jpg

             

            以上 T 細(xì)胞增殖方法的可能有一種更適合您正在進行的實驗,或者可用于您的流式細(xì)胞儀。每種方法都相對容易應(yīng)用到您的下一個實驗,并可以根據(jù)該檢測更好地了解細(xì)胞功能。
             

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