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正所謂有“前世今生"的物件兒都不簡單,今天小通就給大家介紹在實驗室非常常見的一個儀器——液相色譜。挖挖他的“前世今生",給各位儀粉兒們科普一下。詳情如下:
液相色譜是一類分離與分析技術,其特點是以液體作為流動相,固定相可以有多種形式,如紙、薄板和填充床等。在色譜技術發(fā)展的過程中.為了區(qū)分各種方法,根據(jù)固定相的形式產(chǎn)生了各自的命名,如紙色譜、薄層色譜和柱液相色譜。
液相色譜的前世今生
探索科學的意識在人類的思想里可謂一直沒有“缺席"。液相色譜的發(fā)展歷史又是什么樣子的呢?
01. 古羅馬時期
在古羅馬時期的人們就已經(jīng)知道了將一滴含有混合色素的溶液滴在一塊布上,通過觀察溶液展開的同心圓來分析染料與色素了。實際上,這種簡單的操作已經(jīng)采用了現(xiàn)代色譜學的原理。
02. 19世紀中葉
德國化學家Runge對古羅馬人的方法做了一些改進,使之具有了良好的定量以及重現(xiàn)性能力?;瘜W家Goppalsr-oeder也找到了在紙條上分離染料和動植物色譜的方法。同期,植物學家Tswett在1903年提出了應用吸附原理分離植物色譜的方法。他將這種方法命名為色譜,管內填充物為固定相,沖洗劑為流動相。
03. 20多年后
Kuhn為了證實蛋黃內的葉黃素系植物葉黃素與玉米黃質的混合物,參考了Tswett的方法,成功的分離。證實了色譜法可以用于制備分離。
04. 1941年
Martin采用水分飽和的硅膠作為固定相,含有乙醇的氯仿作為流動相分離乙酰基氨基酸的工作是分配色譜的應用。他們也在總結其研究成果的基礎上提出了著名的色譜塔板理論。
液固色譜是最先創(chuàng)立的色譜方法,慢慢的隨著氣相色譜的發(fā)展及應用,人們把氣相色譜中獲得的理論用于研究液相色譜,所以引言里,小譜對于液相色譜的介紹多了一個氣相色譜“異父異母"的親兄弟。
逐漸的,液相色譜柱得到不斷地提高,也使得如今的高效液相色譜得以普及。
05. 1975年
美國Dow Chemical公司Small等研制成功采用電導檢測器的新型離子交換色譜儀,并稱之為離子色譜法(IC)。近年來,為了滿足復雜樣品對于分離柱效的需要,采用更細粒徑固定相的超高壓力的液相色譜(UPLC)問世。
06. 20世紀80年代
國內外著名的分析儀器廠家開始將大量的資金投入到開發(fā)高效液相色譜產(chǎn)品中。使之產(chǎn)品的更新迭代非常的迅速,性能不斷提高,功能不斷增強。不到十年就研制出了LC-3A、LC-4A等產(chǎn)品。使液相色譜出現(xiàn)了質的飛躍。
液相色譜的分類
液相色譜按照分離機理,一般可以分為4種類型
01. 吸附色譜法:固定相為吸附劑,不進入固定相的內部。一般可采用梯度淋洗法來提高色譜分離效率。
02. 分配色譜法:固定相和流動相都是液體,類似萃取過程。
03. 離子交換色譜:固定相為離子交換樹脂,一般是樣品離子與固定相離子進行可逆交換。如今已廣泛適用于氨基酸、蛋白質的分析等。
04. 凝膠色譜法:目前適用于水溶液的體系,又適用于有機溶劑的體系。在生物界的應用較多。
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