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電動移液器制備384孔板，快穩(wěn)準
在高通量應用中，384孔板的制備越來越普遍，與此同時，減少樣品制備差異和用戶錯誤的需求也在增加。
賽多利斯Picus® Nxt 電動移液器可簡化樣品制備流程，提高速度和準確度。其具有的多種功能不僅可減少移液錯誤，還允許用戶更快生成數據。
《使用Picus® 移液器在384孔板中制備標準樣品》
下載文檔
下載本篇應用說明，了解如何為常見細胞培養(yǎng)任務和細胞樣品制備工作流程選擇正確的電動移液器工具。
384孔板實驗應選擇哪種移液器？
選擇移液器時，必須考慮每個移液器的工作量程。移液器在其標稱（最大）容量下可提供較精確性能。因此，雖然使用單個移液器覆蓋大容量范圍非常方便，但選擇多個移液器將確保獲得可靠的結果。表1列出了基于應用和所需容量推薦的移液器。
表1
如何將樣品從96WP轉到384WP ？
制備384WP檢測時，通常是從96孔板（96WP）格式的樣品或標準來轉移。多通道移液器可輕松將96WP轉到384WP。與手動移液相比，使用電動移液器有助于加快孔板的樣品轉移進程（表2）。另一個好處是，電動移液器的孔板向導功能有助于用戶在每次吸液和排液步驟中始終了然加樣的孔位。
表2
如何在384WP 移液中使用孔板向導功能？
處理少量樣品時，保持正確的孔與移液間的順序是一項挑戰(zhàn)。電動移液器可以使用孔板向導功能防止此類錯誤。例如，將Picus® 移液器的孔板向導功能設置為按列或按行移液，并報告下一行接收液體的孔。
多通道移液器上的孔板向導功能可顯著提高用戶對384WP 制備的信心和速度。
如何在384WP中進行細胞接種和補液？
為了在384WP的每個孔中獲得準確細胞數，須以適當方式制備細胞懸液或稀釋液。這只需通過根據良好移液操作對電動移液器進行編程即可（表3）。
表3
不良移液操作（快速排液、產生氣泡）以及在細胞接種后立即將孔板放入培養(yǎng)箱，會導致細胞在孔中分布不均勻（圖1A）。與良好移液操作相比，這可能會導致細胞數量在細胞接種后24小時內減少70%。良好移液操作可實現均勻細胞分布和良好細胞活力（圖1B）。
圖1. B16F10 小鼠黑色素瘤細胞以（A）不良和（B）良好移液操作在384 孔板中接種。
可通過調節(jié)電動移液器的吸液和排液速度，以溫和方式進行細胞培養(yǎng)補液（培養(yǎng)基更換），盡量降低分離粘附細胞的風險。移液速度過快或正向移液會產生氣泡并對實驗產生負面影響（圖2A）。該問題可通過反向移液或使用多次分液模式輕松避免，該模式無需最后一次吹空即可輸送目標體積（圖2B）。
圖2. 在384 孔板中接種細胞或向其分配細胞培養(yǎng)基時，移液模式很重要。
A）如果通過正向移液添加培養(yǎng)基，則會形成氣泡。細胞培養(yǎng)基DMEM + 10% FBS.
B）將培養(yǎng)基移至384 孔板的孔中，反向移液或多次分液不會形成氣泡。
多次分液模式顯著加快了384WP中細胞接種或培養(yǎng)基更換的速度（表4）。
表4
賽多利斯 iQue® Screener 的實驗制備應使用哪種Picus® Nxt 移液器？
iQue® 試劑盒說明書包含了每個工作流程步驟的詳細描述，這些方案使用了Picus® 移液器開發(fā)。圖3和表5列出了我們?yōu)樵?84WP 中制備iQue® 人T細胞活化及細胞因子分析（TCA）試劑盒的每個步驟推薦的移液器和設置。
圖3
表5
總結
電動移液器在涉及384WP的細胞培養(yǎng)應用中具有許多優(yōu)勢。電動移液器的移液模式和速度等移液操作標準化有助于改善細胞健康，減少用戶間的差異，使實驗結果更具可重復性。孔板向導功能尤其有助于避免用戶在長時間連續(xù)移液的工作流程中出錯。重要的是，電動移液器具有符合人體工程學的優(yōu)點，有助于防止用戶疲勞，從而進一步增強對數據準確度的信心。