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DMEM培養(yǎng)基配置的方法以及注意事項(xiàng)
閱讀：5016 發(fā)布時(shí)間：2013-9-18配制DMEM培養(yǎng)基過濾前和過濾后的NaHCO3，雙抗體可以添加，也可以不加，能加入漿液過濾，在好的或，見細(xì)胞和血清濃度，不同，不同的細(xì)胞需要的同時(shí)，凍存細(xì)胞需要培養(yǎng)基血清含量較高，一般為20%-30%。此外，包裝后的培養(yǎng)基和血清過濾，除了被用于一瓶，其他存儲(chǔ)在-20度，或一部分，如谷氨酰胺易降解。
配制DMEM培養(yǎng)基可以先用后的體積是2/3的水溶解配制，包裝袋也需要清洗。2G*溶解的碳酸氫鈉此外，加雙抗后，定容至終體積。過濾到零下20攝氏度保存。添加血清的時(shí)候。
根據(jù)我的經(jīng)驗(yàn)，配制DMEM培養(yǎng)基正常血清沒有過濾，雙抗體不需要過濾，可添加在前面（如果需要的話，除非雙反）培養(yǎng)基的罕見的內(nèi)容，否則就不需要在零下20攝氏度保存，培養(yǎng)兩周跑出去不在4存儲(chǔ)任何問題。另外，我不同意與冷凍細(xì)胞明顯高于血清，沒有根據(jù)。在ATCC細(xì)胞凍存的描述看，我很少使用血清，一般10%二甲基亞砜+90%和冷凍液配方血清中是常用的。凍存存活率*的細(xì)胞。（當(dāng)然，冷凍也是非常重要的存儲(chǔ)過程）
配制DMEM培養(yǎng)基時(shí)血清不必要過濾，但我認(rèn)為雙反應(yīng)進(jìn)行過濾，畢竟，是不是很麻煩。同時(shí)對(duì)細(xì)胞冷凍血清添加量存在著一定的問題，重要的是冷凍程序，如離心速度不太大，有二甲基亞砜的量不能超過10%，這是非常重要的。
配制DMEM培養(yǎng)基除了DMEM粉末直接加入，也應(yīng)按照說明書添加碳酸氫鈉適量，它是關(guān)于2G，pH值可能遠(yuǎn)大于你所需要的pH值，再加入適量HEPES，約2.38g，pH滿意度，根據(jù)需要添加雙抗，過濾，分裝。如果數(shù)量不多，儲(chǔ)存超過20度，必要時(shí)添加血清，血清是不需要消毒，因?yàn)楹细裱逡堰_(dá)到無菌的條件下，搖它