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            技術(shù)文章

            純化線粒體凍存液產(chǎn)品說(shuō)明書

            閱讀:1062          發(fā)布時(shí)間:2023-7-27

             純化線粒體凍存液產(chǎn)品說(shuō)明書

             

            主要用途

             

             純化線粒體凍存液是一種旨在幫助冷凍環(huán)境下儲(chǔ)存各種分離的純化線粒體(人體和動(dòng)物等),確  保其膜完整性、維持新鮮狀態(tài)的超微結(jié)構(gòu)和生物學(xué)功能的保護(hù)性介質(zhì)。該溶液由大師級(jí)科學(xué)家精心研制、  成功實(shí)驗(yàn)證明的。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌, 即到即用, 性能穩(wěn)定, 無(wú)病毒和支原體, 維護(hù)線粒體活力高達(dá) 95%以上。

             

            技術(shù)背景

             

            凍存保護(hù)(Cryopreservation)是長(zhǎng)期儲(chǔ)藏和保存生物活體材料的基本手段。但是,在凍存過(guò)程中活體將受 到物理或化學(xué)性傷害諸如冰結(jié)晶體的形成、滲透壓的變化以及化學(xué)物毒性等,尤其是致命性的活體內(nèi)冰產(chǎn) 生, 所導(dǎo)致?tīng)垦雍涂s水等物理性損傷。作為凍存保護(hù)劑之一的丙三醇(Glycerol)被證實(shí)能夠阻止冰晶體的 發(fā)生。根據(jù)線粒體的生物學(xué)需求, 凍存溶液含有海藻糖(Trehalose),一種天然性二糖, 在植物中幫助共生 的物質(zhì), 且防止脫水。在線粒體保存中, 維護(hù)膜完整性、維持新鮮狀態(tài)下的超微結(jié)構(gòu)和生物學(xué)功能達(dá)到 95 %以上,包括 ATP 合成,膜電位,鈣誘導(dǎo)性腫脹等。

             

            產(chǎn)品內(nèi)容

             


             凍存液(Reagent A

            產(chǎn)品說(shuō)明書

             

            保存方式

             

            保存  凍存液(Reagent A)在-20℃的冰箱里,有效保證 6 

             

            用戶自備

             

            1.5 毫升離心管:用于線粒體收集后離心

            4℃微型臺(tái)式離心機(jī):用于沉淀線粒體

            2 毫升凍存管:用于線粒體冷凍儲(chǔ)藏

             

            實(shí)驗(yàn)步驟

             

            實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前, 將試劑盒里的  凍存液(Reagent A從-20℃的冰箱里取出, 置于室溫下溶化。然 后進(jìn)行下列操作。

             

            1  將分離純化的 500 微升線粒體懸液(50 毫克/毫升)移入到 1.5 毫升離心管

            2  放進(jìn) 4℃微型臺(tái)式離心機(jī)離心 5 分鐘,速度為 16000g(或 13000RPM,例如 EPPENDORF 5415 3  小心抽去上清液

            4  加入 xx 微升  凍存液(Reagent A

            5  輕輕混勻顆粒群


            6  分批 50 微升移入到干冰預(yù)冷的凍存管里

            7  即刻放進(jìn)液氮罐里快速冷凍

            8  24 小時(shí)后,放進(jìn)-70℃的冰箱里保存

             

            注意事項(xiàng)

             

            1. 本產(chǎn)品為 50 毫升規(guī)格

            2. 所有凍存操作和使用工具均須在嚴(yán)格無(wú)菌狀態(tài)下進(jìn)行

            3. 操作時(shí),避免污染母液

            4. 如果線粒體懸液容量低于 xx 微升,可以直接加入  凍存液(Reagent A 

            5. 凍存管線粒體凍存量可以達(dá)到每毫升 50 毫克

            6. 凍存和解凍的基本原則是冷凍速度快速(放進(jìn)液氮后快速冷凍, 再放進(jìn)-70℃冰箱里保存),解凍速度 快速(用手捂熱解凍)

            7. 本產(chǎn)品可以部分保護(hù)部分線粒體生物能量學(xué)功能

            8. 本公司提供系列細(xì)胞凍存產(chǎn)品

             

            質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

             

            1  本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定

            2  本產(chǎn)品經(jīng)鑒定無(wú)病毒和支原體污染

            3  本產(chǎn)品經(jīng)鑒定維護(hù)線粒體活力高達(dá) 95%以上

             


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