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鑒別豬胸膜肺炎放線(xiàn)桿菌ApxⅣ-ELISA試劑盒的研制與應(yīng)用
閱讀：595 發(fā)布時(shí)間：2016-3-30胸膜肺炎放線(xiàn)桿菌（Actinobacillus pleuropneumoniae，APP）是一種嚴(yán)重危害世界養(yǎng)豬業(yè)的重要病原菌，至少有15種血清型，根據(jù)所有血清型菌株僅在感染豬體內(nèi)產(chǎn)生外毒素ApxⅣ的特點(diǎn)，建立了一種能夠區(qū)分感染豬與免疫豬的鑒別診斷方法ApxⅣ-ELISA.研究在反應(yīng)條件方面加以?xún)?yōu)化，將該診斷方法進(jìn)一步研制成試劑盒，對(duì)其特異性、敏感性、重復(fù)性和穩(wěn)定性進(jìn)行了測(cè)試，與間接血凝試驗(yàn)及IDEXX公司的CHEKIT-APP-APXⅣ試劑盒進(jìn)行了對(duì)比研究，并用該試劑盒檢測(cè)了來(lái)自中國(guó)、英國(guó)、丹麥、美國(guó)、加拿大、澳大利亞等國(guó)的臨床豬血清1453份。
結(jié)果表明，ApxⅣ-ELISA試劑盒具有很高的特異性和敏感性，與CHEKIT-APP-APXⅣ試劑盒的檢測(cè)符合率為91.37%；3批試劑盒的批內(nèi)和批間重復(fù)性良好（變異系數(shù)均<15%）；試劑盒在2～8℃保存9個(gè)月內(nèi)穩(wěn)定性良好。所檢種豬血樣中，來(lái)自中國(guó)豬場(chǎng)1、中國(guó)豬場(chǎng)2、美國(guó)、加拿大、丹麥、澳大利亞和英國(guó)的ApxⅣ抗體陽(yáng)性率分別為30.05%、70.69%、39.72%、0.64%、42.22%、1.85%和93.94%；所檢我國(guó)2個(gè)規(guī)模化豬場(chǎng)的仔豬ApxIV抗體陽(yáng)性率分別為21.77%和27.15%，育肥豬的陽(yáng)性率分別為5.51%和11.07%。研究表明，ApxⅣ-ELISA試劑盒能夠有效區(qū)分APP感染豬與三價(jià)滅活疫苗或亞單位疫苗免疫豬。