1.洗滌液配制 用蒸餾水或去離子水將濃縮洗滌液（2號(hào)液）按1：10稀釋?zhuān)缛?0ml濃縮液與450ml蒸餾水或去離子水充分混勻即為工作洗滌液。
2.樣本稀釋 用樣本稀釋液(5號(hào)液)將待檢血清樣本按1：100稀釋?zhuān)缛?ul樣本與495ul樣本稀釋液，混勻。陰性、陽(yáng)性對(duì)照品不用稀釋?zhuān)苯蛹訕印?/div>
3.加樣反應(yīng) 每次試驗(yàn)設(shè)陰性對(duì)照2孔、陽(yáng)性及空白對(duì)照各1孔(分別加入陰性、陽(yáng)性對(duì)照及樣本稀釋液100ul)。樣本檢測(cè)孔每孔加已稀釋血清樣本100ul。37℃避光反應(yīng)30分鐘后，甩去孔內(nèi)液體，每孔注滿(mǎn)工作洗滌液洗滌3次，每次均需停留1分鐘后再甩凈，拍干。
4.加酶反應(yīng) 除空白對(duì)照孔外，每孔加酶結(jié)合物(1號(hào)液) 1滴。37℃避光反應(yīng)30分鐘后，甩去孔內(nèi)液體，如上洗滌，拍干。
5.顯色反應(yīng) 加底物液(3號(hào)液)和顯色劑(4號(hào)液)各1滴，混勻，37℃避光顯色10分鐘。加終止液(6號(hào)液)1滴，終止反應(yīng)（加終止液后，藍(lán)色會(huì)變?yōu)辄S色）并判讀結(jié)果。
抗體粗純化試劑盒的結(jié)果判斷：
以空白對(duì)照調(diào)零，用酶標(biāo)儀于450nm（630nm作參比波長(zhǎng)）讀取吸光度（A值）。待檢樣本孔A值大于等于陰性對(duì)照A值的3.1倍者判為陽(yáng)性。如陰性對(duì)照A值低于0.1時(shí)按0.1計(jì)算。
抗體粗純化試劑盒的注意事項(xiàng)：
1.抗體粗純化試劑盒于2-8℃保存，每次使用前應(yīng)先平衡至室溫。
2.未使用完的板條應(yīng)密封保存。
3.抗體粗純化試劑盒中終止液具有腐蝕性，要小心使用。
4.瓶蓋每次使用后要擰緊，各瓶蓋之間不可混用。不同批號(hào)抗體粗純化試劑盒的試劑組份不可混用。
5.試驗(yàn)樣本應(yīng)為無(wú)染菌、無(wú)血脂、無(wú)溶血的血清或血漿。任何樣本都應(yīng)視為傳染源妥善處理。
6.37℃孵育時(shí)，建議使用水浴箱。如無(wú)條件，可在溫箱中放置濕盒進(jìn)行反應(yīng)并同時(shí)用不干膠膜封蓋板孔。
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