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【新國標(biāo)應(yīng)用案例】使用TSKgel凝膠色譜柱測定食品中膳食纖維
食品中的膳食纖維是人體的第七大營養(yǎng)素，具有抑制糖脂吸收，促進(jìn)腸道蠕動(dòng)等生理保健功能。食品中膳食纖維的含量檢測對于衡量食品包裝的營養(yǎng)成分標(biāo)識(shí)準(zhǔn)確性具有重要作用。
今年9月，國家衛(wèi)生健康委員會(huì)、國家市場監(jiān)管總局發(fā)布了GB 5009.88-2023《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中膳食纖維的測定》等85項(xiàng)食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)和3項(xiàng)修改單。該標(biāo)準(zhǔn)將于2024年3月6日正式實(shí)施。本標(biāo)準(zhǔn)將替代GB 5009.88-2014《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中膳食纖維的測定》。
本應(yīng)用參照上述新國標(biāo)，使用凝膠色譜柱TSKgel G2500PWXL（7.8 mmI.D.×30 cm, 7 μm）兩支串聯(lián)對D-葡萄糖做標(biāo)準(zhǔn)系列工作液定量分析。按照國標(biāo)中的要求，標(biāo)準(zhǔn)曲線過0點(diǎn)的斜率為1.2545即為響應(yīng)因子（Rf），蔗果三糖與麥芽糖的分離度也達(dá)到了1.82，符合國標(biāo)中基線分離的要求。
1）二甘醇內(nèi)標(biāo)溶液 (100 mg/mL) ：準(zhǔn)確稱取10 g二甘醇，用水稀釋，轉(zhuǎn)移至100 mL容量瓶中，加水定容至刻度，現(xiàn)用現(xiàn)配。
2）D-葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液 (10 mg/mL) ：準(zhǔn)確稱取1 g D-葡萄糖，用水溶解后轉(zhuǎn)移至100 mL容量瓶中，加水定容至刻度?，F(xiàn)用現(xiàn)配。
3）D-葡萄糖/二甘醇溶液標(biāo)準(zhǔn)系列工作液：分別吸取0.5 mL、1.0 mL、2.0 mL、4.0 mL和8.0 mL 10 mg/mL D-葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液至10 mL容量瓶中，再加入0.2 mL 100 mg/mL二甘醇內(nèi)標(biāo)溶液，加水稀釋并定容至刻度。標(biāo)準(zhǔn)系列工作液中D-葡萄糖含量分別相當(dāng)于0.5 mg/mL、1.0 mg/mL、2.0 mg/mL、4.0 mg/mL和8.0 mg/mL，二甘醇含量相當(dāng)于2.0 mg/mL。現(xiàn)用現(xiàn)配。
4）定性用標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取0.1 g蔗果三糖和0.1 g 麥芽糖一水合物，用水溶解，轉(zhuǎn)移至50 mL容量瓶中，加入1 mL 100 mg/mL二甘醇內(nèi)標(biāo)溶液，加水定容至刻度?，F(xiàn)用現(xiàn)配。
儀器：Thermo Ultimate 3000
色譜柱：TSKgel G2500PWXL × 2根串聯(lián)（7.8 mm I.D.×30 cm, 7 μm）
流動(dòng)相：水
流速：0.5 mL/min
柱溫：80℃
進(jìn)樣量：20 μL
檢測器：RI@50℃
圖1 定性用標(biāo)準(zhǔn)溶液
圖2 D-葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)系列工作液
圖3 木糖濃度-峰面積校正曲線