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            選擇性分析寄生蟲的新技術

            閱讀:236          發(fā)布時間:2016-7-14

                ELISA試劑盒這些寄生蟲都歸在一個叫Laverania的亞屬。這個亞屬包括7種瘧原蟲,其中6種寄生于猿(黑猩猩和大猩猩),1種寄生于人體。與導致人類瘧疾的惡性瘧原蟲(Plasmodium falciparum)親緣關系zui近的種類只存在于大猩猩中,不過研究人員無法獲得血液樣本,因為大猩猩是受保護動物。

            因此,研究人員決定把重點放在黑猩猩的寄生蟲上。盡管黑猩猩也是受保護的物種,但研究人員使用了體檢后剩余的血液樣本。由于樣本量很少,他們只好想方設法,選擇性擴增寄生蟲的基因組。

            這項技術利用專門設計的引物和phi29聚合酶,這種引物與瘧原蟲中常見但宿主基因組中少有的DNA motif結合。研究人員對P. gaboni和P. reichenowi基因組進行選擇性擴增,并在Illumina的MiSeq平臺上測序。

            之后,研究人員開展全基因組分析,發(fā)現(xiàn)他們能夠創(chuàng)建三個全基因組,除了亞端粒區(qū)域,這可能要歸結為組裝的問題,而不是擴增。研究人員表示,他們希望未來能使用Pacific Biosciences的技術,因為更長的讀取將改善組裝。

            他們發(fā)現(xiàn),這些基因組實際上的確代表了以前未證實的不同物種,并且沒有任何跨物種交配的證據(jù)。研究人員觀察到,這兩種寄生蟲的遺傳多樣性大約是惡性瘧原蟲的10倍,這表明人類寄生蟲已經(jīng)經(jīng)歷了一個嚴重的遺傳瓶頸。

            值得注意的是,研究人員發(fā)現(xiàn)了一個多基因家族的Laverania特異擴增,這個家族與紅細胞重構有關。他們還發(fā)現(xiàn),4號染色體上一段短區(qū)域被水平轉移到惡性瘧原蟲的祖先上,這段區(qū)域編碼了兩個功能相關的必要侵襲基因。

            研究人員認為,這種選擇性全基因組擴增方法不僅能研究稀有物種的寄生蟲,還有其他的潛在應用。在資源匱乏的情況下,研究人員手頭沒有任何材料純化寄生蟲,只能獲取少量血液,這時也可以采用。

            FAT    鈣粘蛋白家族成員7抗體                
            FNDC5    Ⅲ型纖維連接蛋白域蛋白2/5抗體                
            Filamin A    細絲蛋白A抗體                
            phospho-Filamin A (Ser2151)    磷酸化細絲蛋白A抗體                
            phospho-Filamin A(Ser2522)    磷酸化細絲蛋白A抗體                
            FANCG    DNA損傷修復基因XRCC9抗體                
            phospho-FLNA (Tyr1046)    磷酸化細絲蛋白A抗體                
            phospho-FXYD1 (Ser83)    磷酸化磷酸神經(jīng)膜抗體                
            Phospho-FGFR1+FGFR2 (Tyr463)     磷酸化堿性成纖維細胞生長因子受體1抗體                
            phospho-FXYD1 (Ser88)    磷酸化磷酸神經(jīng)膜抗體                
            FOXN1    叉頭蛋白N1抗體                

            ELISA試劑盒

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