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ELISA試劑盒靈敏度的高低判斷
閱讀:99 發(fā)布時間:2016-1-27根據(jù)何的統(tǒng)計與調(diào)查,ELISA試劑盒被廣泛應用的原因主要有準確性高、靈敏度高、特異性強的諸多因素。但這些優(yōu)點,并非全部的試劑盒都有具備,
其實,ELISA靈敏度和檢測樣本有些關聯(lián)的,如果待測樣本中目標蛋白的濃度比較高,則對靈敏度要求相對小一些。如果待測樣本中目標蛋白的濃度比較低,則必須考慮靈敏度的問題。
一般來說,試劑盒曲線上的zui小濃度是比較準確的,低于這個值因為與曲線是個“S"型結(jié)構有關,所以結(jié)果是有偏差的,是一種估算。再加上實驗誤差,所以達不到理想的效果。建議選擇試劑盒時,應該看曲線上zui小的濃度值,而不是試劑盒上寫的靈敏度。
雖然酶活性調(diào)節(jié)ELISA方法的靈敏度目前并不十分理想,但在酶活性放大ELISA中,檢測的靈敏度遠比RIA高。ELISA試劑盒根據(jù)質(zhì)量作用定律。即免疫反應所形成的免疫復合物量與反應物濃度成正比。推測所檢測的待測物分子數(shù)為1。已知1個摩爾濃度含6.02×1023個分子,那么理論推測酶活性放大ELISA方法的zui低檢測限可達1.7×10-24mol/L。雖然在實際應用中由于反應條件和試劑純度以及儀器精度等因素的影響,往往達不到這個水平(大于104個分子),但表明ELISA在靈敏度方面的改進潛力是很大的。