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       細胞培養(yǎng)基既是培養(yǎng)細胞中供給細胞營養(yǎng)和促使細胞生殖增殖的基礎(chǔ)物質(zhì)，也是培養(yǎng)細胞生長和繁殖的生存環(huán)境。常見的種類如下：

1、無機鹽 

培養(yǎng)液中無機鹽的主要功能是幫助細胞維持滲透壓平衡。此外，通過提供鈉，鉀和鈣離子，幫助細胞調(diào)節(jié)細胞膜功能。

培養(yǎng)液的滲透壓是一個非常重要的因素， 細胞通?？赡褪?60mOsm/kg 320 mOsm/kg。標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)液的滲透壓在此范圍內(nèi)波動。

特別注意：向培養(yǎng)液中加入其它物質(zhì)有可能會明顯改變培養(yǎng)液的滲透壓，特別是溶于強酸或強堿中的物質(zhì)。向培養(yǎng)液中添加HEPES時需按以下方法調(diào)節(jié)鈉離子濃度。

 

2、 氨基酸

氨基酸是組成蛋白質(zhì)的基本單位，不同種類的細胞對氨基酸的要求各異，但有幾種氨基酸細胞自身不能合成，必須依靠培養(yǎng)液提供，這幾種氨基酸稱為必需氨基酸。

其中谷氨酰胺是細胞合成核酸和蛋白質(zhì)必需的氨基酸，在缺少谷氨酰胺時，細胞生長不良而死亡。因此，各種培養(yǎng)液中都有較大量的谷氨酰胺。

但由于谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定，應(yīng)置于-20℃冰箱中保存，在使用前加入培養(yǎng)液內(nèi)。已含谷氨酰胺的培養(yǎng)液在4℃冰箱中儲存2周以上時，還應(yīng)重新加入原來量的谷氨酰胺。

 

3、碳水化合物

碳水化合物是細胞生長主要能量來源，其中有的是合成蛋白質(zhì)和核酸的成分。主要有葡萄糖，核糖，脫氧核糖，丙酮酸鈉和醋酸等。

 

4、維生素

在細胞培養(yǎng)中，盡管血清是維生素重要來源， 但是許多培養(yǎng)基中添加了各種維生素以適合更多的細胞系生長。

 

5、緩沖系統(tǒng)

大多數(shù)細胞所需pH 在 7.2 - 7.4。但細胞培養(yǎng)適pH值隨培養(yǎng)的細胞種類不同而不同。成纖維細胞喜歡較高pH （7.4 - 7.7）， 而傳代轉(zhuǎn)化細胞系則需要偏酸pH （7.0 - 7.4）。由于多數(shù)培養(yǎng)液靠碳酸氫鈉（NaHCO3）與CO2體系進行緩沖，因此氣相中的CO2濃度應(yīng)與培養(yǎng)液中碳酸氫鈉濃度相平衡。

如果氣相或培養(yǎng)箱空氣中CO2濃度設(shè)定在5%，培養(yǎng)液中NaHCO3的加入量為1。97g/L;如果CO2濃度維持在10%，培養(yǎng)液中NaHCO3的加入量為3。95g/L。

細胞培養(yǎng)瓶蓋不應(yīng)擰得太緊，以保證氣體交換。 HEPES 是一種非離子緩沖液，在pH 7.2 - 7.4 范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力，但是非常昂貴，在高濃度時對一些細胞可能有毒。HEPES緩沖液可與低水平的碳酸鈉（0.34g/L）共用，以抵消因額外加入HEPES引起的滲透壓增加。

在這種培養(yǎng)條件下，細胞培養(yǎng)瓶的蓋子應(yīng)擰緊，以防止培養(yǎng)液中所需的少量碳酸鹽散入空氣中，大多數(shù)培養(yǎng)液中含有酚紅作為pH指示劑，酸性培養(yǎng)液呈橙黃色，堿性培養(yǎng)液呈深紅色。

 

6、 其它成分

在一些較為復(fù)雜的培養(yǎng)液中還包括其它一些成分。如在雜交瘤技術(shù)中常用的DMEM培養(yǎng)液，使用時還需要補加丙酮酸鈉和2-巰乙醇（2-Mercaptoethanol，2-Me）。

2-Me 對細胞生長有很重要的作用。有人認為它相當(dāng)于胎牛血清，有直接刺激細胞增殖作用。2-Me的活性部分是硫氫基，其中一個重要作用是使血清中含硫的化合物還原成谷胱甘肽，能誘導(dǎo)細胞的增殖，為非特異性的激活作用。

同時避免過氧化物對培養(yǎng)細胞的損害。另一個重要作用是促進分裂原的反應(yīng)和DNA合成，增加植物凝集素（PHA）對淋巴細胞的轉(zhuǎn)化作用，已廣泛應(yīng)用于雜交瘤技術(shù)，另外，也開始用于一些難以培養(yǎng)的細胞。2-Me是一種小分子還原劑，極易氧化。

分子量為78.13，純的2-Me是一種無色有刺激味的液體，比重為1.110-1.120（Do20），常用終濃度為5×10-5M，常配制成0.1M的儲存液，用時每升培養(yǎng)液加0.5ml。