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分光光度計(jì)工作原理及測(cè)定方法
2016-7-27 閱讀(2365)
分光光度計(jì)工作原理
分光光度計(jì)測(cè)量根據(jù)朗伯一比耳定律A=KCL,其中A為吸光度,K為吸光系數(shù),C為溶液濃度,L為液層厚度。雖然,分光光度計(jì)是比較精密的儀器,但它不可能無(wú)限地符合朗伯一比耳定律。儀器的靈敏度不同,它所檢測(cè)溶液濃度的范圍也不同。當(dāng)檢測(cè)物質(zhì)的濃度較高時(shí),將會(huì)對(duì)單色光產(chǎn)生大量的吸收,使達(dá)到檢測(cè)器的能量較弱,超出儀器的檢測(cè)的范圍。同樣,當(dāng)被測(cè)物質(zhì)很稀時(shí),溶液對(duì)單色光的吸收很少,因而,達(dá)到檢測(cè)器的光的能量較高,從而使檢測(cè)器處于臨界飽和狀態(tài)下工作,在這些情況下,儀器對(duì)樣品的檢測(cè)將會(huì)發(fā)生嚴(yán)重的失真。所以每臺(tái)儀器都有一定的測(cè)量范圍,都有一定的靈敏度。
朗伯一比耳定律是對(duì)單色光而言,但實(shí)際上,目前各種分光光度計(jì)分光后所得到的光,一般都是復(fù)合光,即或多或少含有在工作波長(zhǎng)附近的雜散光,同樣,單色器的出射狹縫總有一定的寬度,出射的光一般都是一個(gè)波段的光,這些雜散光會(huì)引起朗伯一比耳定律的偏離。檢測(cè)方法是利用一些溶液只對(duì)某一波長(zhǎng)的光有較強(qiáng)的吸收,而對(duì)其附近波長(zhǎng)的光不吸收,當(dāng)儀器在此波長(zhǎng)下測(cè)量很濃的這些樣品,其透過(guò)率應(yīng)為零,但由于有雜散光的存在,其讀數(shù)不一定為零。
分光光度計(jì)測(cè)定方法
測(cè)定靈敏度時(shí),采用如下的指標(biāo):
(1)在波長(zhǎng)440nm處測(cè)量濃度為30ppm與32.5ppm的K2Cr2O7的H2SO4溶液(以0.1NH2SO4溶液為空白),其吸光度A之差應(yīng)不小于0.01A。
(2)在波長(zhǎng)為510nm處,測(cè)量濃度為2000ppm與2150ppm的CoCl2的HCl溶液(以0.1N的HCl溶液為空白),其吸光度A之差應(yīng)不小于0.01A。
(3)在波長(zhǎng)為690nm處,測(cè)量濃度為2000ppm與2150ppm的CuSO4的H2SO4溶液(用0.1N的H2SO4溶液為空白),其吸光度A之差應(yīng)不小于0.01A。
測(cè)定雜散光時(shí)、采用如下的指標(biāo):
(1)對(duì)于可見(jiàn)光分光光度計(jì),用蒸餾水作參比,在620nm處,用10mm石英比色皿,測(cè)量0.005%的亞甲藍(lán),其透過(guò)率應(yīng)小于1%。
(2)對(duì)于紫外分光光度計(jì):
(a)用10mm石英比色皿,用蒸餾水作參比,在310nm處,測(cè)量分析純丙酮,其透過(guò)率應(yīng)小1%。
(b)用10mm石英比色皿,用蒸餾水作參比,在210nm處,測(cè)量0.1mol/L的NaBr溶液,其透過(guò)率應(yīng)小于1%。
