mediomics 1-1-1004說明書
Bridge-It® S-Adenosyl Methionine (SAM) Fluorescence Assay Kit, 384-well format
貨號：1-1-1004。類別：384 孔板, Bridge-It 檢測, DNA 甲基化,神經(jīng)科學(xué), SAM。標(biāo)簽：384 孔，AdoMet，Bridge-It，S-腺苷蛋氨酸，SAM，SAMe。
描述
Bridge-It® S-腺苷甲硫氨酸 (SAM) 熒光檢測試劑盒，384 孔格式
應(yīng)用：
定量生物體液、細(xì)胞培養(yǎng)和發(fā)酵培養(yǎng)基以及組織和細(xì)胞提取物中的 SAM 水平
表觀遺傳學(xué)和甲基化研究
許多神經(jīng)和精神疾病，包括阿爾茨海默病、抑郁癥、艾滋病毒相關(guān)的神經(jīng)功能障礙/癡呆、多發(fā)性硬化癥、帕金森病、脊髓退化、癲癇、纖維肌痛、偏頭痛，以及慢性肝功能障礙、動脈硬化和癌癥
特征：
簡單： 將測試樣品或標(biāo)準(zhǔn)品與檢測溶液混合并在 ~25°C 下孵育
快速： 孵育 30 分鐘后讀取熒光信號
靈敏： 測定法以 0.5 µM 的檢測下限測量 SAM（即 96 孔中的 50 pmol/孔或 384 孔黑色微孔板中的 20 pmol）
靈活： 檢測適用于低通量和高通量篩選形式
S-腺苷蛋氨酸和 Bridge-It 熒光檢測的背景信息
S-腺苷蛋氨酸
S-腺苷甲硫氨酸（也稱為 SAM、SAMe 或 AdoMet）在所有類型生物體的甲基化生物學(xué)過程中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。在甲基化循環(huán)中，SAM 充當(dāng)甲基的供體，用于 DNA 和蛋白質(zhì)的共價修飾。SAM 水平的變化與衰老過程、許多神經(jīng)和精神疾病有關(guān)，包括阿爾茨海默病、抑郁癥、HIV 相關(guān)的神經(jīng)功能障礙/癡呆、多發(fā)性硬化癥、帕金森病、脊髓退化、癲癇、纖維肌痛、偏頭痛和還有慢性肝功能不全、動脈硬化和癌癥。目前，SAM 使用高壓液相色譜 (HPLC) 方法進(jìn)行量化。HPLC 耗時、昂貴，而且由于需要大量的有機(jī)溶劑，
Bridge-It ® S-腺苷蛋氨酸熒光 (SAM) 檢測1,2
Mediomics Bridge-It ® S-腺苷蛋氨酸 (SAM) 熒光檢測方法基于成熟的熒光測量技術(shù)和我們獲得新型檢測平臺設(shè)計的結(jié)合它利用 DNA 結(jié)合蛋白作為它們各自的小分子共調(diào)節(jié)因子（配體）的生物傳感器。DNA 序列特異性 MetJ 蛋白對其DNA 結(jié)合位點(diǎn)的親和力在其配體 S-腺苷甲硫氨酸的存在下大大增加。對于該測定，MetJ 共有序列被分成兩個 DNA“半位點(diǎn)"。一半片段用熒光素標(biāo)記，另一半片段用 Oyster ® 645 熒光團(tuán)標(biāo)記3,4。測試樣品中 SAM 的相對量將影響測定中 DNA-MetJ 蛋白復(fù)合物形成的量。當(dāng)這種復(fù)合物形成時，它會使熒光標(biāo)記的 DNA 半位點(diǎn)靠近并導(dǎo)致熒光信號發(fā)射發(fā)生可測量的變化（增加），這可以使用酶標(biāo)儀輕松測量（波長設(shè)置：吸收 485 nm；發(fā)射 665 nm ）。然后使用 SAM 標(biāo)準(zhǔn)曲線確定測試樣品中的 SAM 濃度。Bridge-It ® SAM 熒光檢測方法表現(xiàn)出非常理想的性能特征，包括高 (>6:1) 信號與背景 (S/B) 比、寬檢測范圍 (~0.4 µM – 100 µM) 以及 0.4 µM 的檢測靈敏度。該檢測水平 (0.4 µM) 可用于量化大多數(shù)感興趣的測試樣品中的 SAM，包括生物體液、細(xì)胞培養(yǎng)和發(fā)酵培養(yǎng)基以及組織和細(xì)胞的提取物。
與 HPLC 程序相比，Bridge-It ® SAM 熒光檢測方法采用 384 和 96 孔微孔板形式。因此，它非常適合在大量測試樣品中快速、同時測量 SAM 水平。此外，這種方法很容易適應(yīng)目前用于藥物發(fā)現(xiàn)研究的高通量篩選平臺。
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