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蛋白印跡儀的用途及注意事項(xiàng)
蛋白印跡儀被廣泛應(yīng)用于臨床診斷領(lǐng)域，如篩選和確診引起感染性疾病的不同致病源（如病毒或細(xì)菌），以及過敏原鑒定。全自動(dòng)蛋白印跡儀能將蛋白印跡處理中的所有關(guān)鍵步驟自動(dòng)化，尤其是繁瑣的清洗和孵育步驟。
蛋白質(zhì)印跡法，它是分子生物學(xué)、生物化學(xué)和免疫遺傳學(xué)中常用的一種實(shí)驗(yàn)方法。其基本原理是通過特異性抗體對(duì)凝膠電泳處理過的細(xì)胞或生物組織樣品進(jìn)行著色。通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質(zhì)在所分析的細(xì)胞或組織中表達(dá)情況的信息。
注意事項(xiàng)：
如果出現(xiàn)非特異性的高背景，可觀察僅用二抗單獨(dú)處理轉(zhuǎn)印膜所產(chǎn)生的背景強(qiáng)度，若高背景確由二抗產(chǎn)生，可適當(dāng)降低二抗?jié)舛然蚩s短二抗孵育時(shí)間;并考慮延長(zhǎng)每一步的清洗時(shí)間。
一抗與二抗的稀釋度、作用時(shí)間和溫度對(duì)檢測(cè)不同的蛋白要求不同，須經(jīng)預(yù)實(shí)驗(yàn)確定最佳條件。
濾紙/凝膠/轉(zhuǎn)印膜/濾紙夾層組合中不能存在氣泡，可用玻璃棒在夾層組合上滾動(dòng)將氣泡趕出，以提高轉(zhuǎn)膜效率;上下兩層濾紙不能過大，避免導(dǎo)致直接接觸而引起短路。