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東南大學(xué)劉老師咨詢細(xì)胞裂解液檢測(cè)IL-24指標(biāo)樣本收集問(wèn)題
閱讀：771 發(fā)布時(shí)間：2015-12-162015年三月份東南大學(xué)張同學(xué)在我司代測(cè)了人IL-24 ELISA試劑盒，現(xiàn)張同學(xué)的實(shí)驗(yàn)課題已圓滿結(jié)束。同實(shí)驗(yàn)室學(xué)生劉同學(xué)受張同學(xué)介紹昨日我司銷售部吳，準(zhǔn)備近期同樣做人IL-24 ELISA試劑盒的課題檢測(cè)。準(zhǔn)備收集人的細(xì)胞裂解液樣本做檢測(cè)。關(guān)于樣本的收集方法希望得到我司的。溝通結(jié)束后，我司技術(shù)部以WORD文檔形式詳細(xì)整理了細(xì)胞裂解液的收集方法答復(fù)劉老師。劉老師也表示，樣本預(yù)計(jì)半個(gè)月左右收集完成，收集完成后將樣本交由我司進(jìn)行代測(cè)。期間任何技術(shù)問(wèn)題我司*時(shí)間提供。
細(xì)胞裂解液收集方法：
1）.吸去培養(yǎng)板內(nèi)的培養(yǎng)基，用胰酶消化細(xì)胞，加適量培養(yǎng)基將細(xì)胞從培養(yǎng)板上吹下來(lái)。懸浮細(xì)胞可省略。
2）.收集細(xì)胞懸液，1000×g離心10min，棄去培養(yǎng)基，用預(yù)冷的PBS潤(rùn)洗3次。
3） .加入適量的預(yù)冷PBS或細(xì)胞裂解液（臨用前加入蛋白酶抑制劑）重懸細(xì)胞。通常6孔板一個(gè)孔的細(xì)胞量需要150~250μL PBS重懸。
4）.將樣品放入-20℃或-80℃，使樣品冷凍，再放室溫解凍樣品，反復(fù)凍融幾次，使細(xì)胞充分裂解。也可將樣品進(jìn)行超聲破碎，以達(dá)到裂解的目的。
5）.4℃ 10000×g 離心10min，除去細(xì)胞碎片，取上清，-20℃或-80℃保存，避免反復(fù)凍融。