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  ELISA實驗終于做完了，結(jié)果被計算難倒了，作為科研人絕不認輸，那恒遠小編就給大家分享下，如何用 Origin 計算 ELISA 實驗結(jié)果。作為 ELISA 實驗的后步，檢測結(jié)果的計算對整個實驗十分重要，不小心就半途而廢了......

 

1.ELISA 的樣本通常要設(shè)置 1~2 個復(fù)孔進行檢測，分別求出標(biāo)準(zhǔn)品、實驗組樣本的吸光度的平均值。單個樣本的檢測值不應(yīng)超出平均值的 20%；

2. 樣本的 OD（吸光度）平均值要減去標(biāo)準(zhǔn)品濃度為 0 時的 OD 平均值；

3. 建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。

在對數(shù)坐標(biāo)圖上擬合四參數(shù)的邏輯函數(shù)曲線（X 軸上為標(biāo)準(zhǔn)品濃度，Y 軸為對應(yīng)的OD值）。推薦使用 origin 軟件。詳細步驟如下：

 

第Ⅰ步：輸入 OD 值和標(biāo)準(zhǔn)品濃度

第Ⅱ步：選擇擬合曲線類型

選中輸入的數(shù)值框，按如下操作依次點擊選項。

第Ⅲ步：勾選「find specific X/Y」

完成上述操作后，點擊 Fit 按鍵，擬合曲線和相關(guān)信息將自動（如第四步所示）

 

第Ⅳ步：查看標(biāo)準(zhǔn)曲線信息（如參數(shù)值，R-Square 等）

 

第Ⅴ步：設(shè)置坐標(biāo)軸類型為對數(shù)

雙擊第四步中的擬合曲線圖，對其進行編輯。雙擊 X 軸、Y 軸設(shè)置坐標(biāo)類型為「Log10」。

 

第Ⅵ步：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣本濃度

選擇第四個工作表（Fit NLF Find X from Y1），在左列輸入樣本的 OD 值，對應(yīng)的濃度將在右列自動。