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            普魯士藍染色液(核固紅法)操作說明

            時間:2016-1-19閱讀:4898
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            普魯士藍染色液(核固紅法)

            產(chǎn)品簡介:

            含鐵血黃素(Hemosiderin)是一種血紅蛋白源性色素,為金黃色或棕黃色顆粒,因其

            含鐵,且為金黃色,故稱為含鐵血黃素。當紅細胞被巨噬細胞吞噬后,在溶酶體酶的作用下,

            血紅蛋白被分解為丌含鐵的橙色血質(zhì)和含鐵的含鐵血黃素。 Perls  普魯士藍反應(Prussian

            blue reaction)又稱為含鐵血黃素染色,即經(jīng)過亞鐵青化鉀和稀酸處理后可以產(chǎn)生藍色,常

            見于吞噬細胞或間質(zhì)內(nèi),其染色原理在于亞鐵化鉀溶液使三價鐵離子從蛋白質(zhì)中被稀鹽酸

            分離出來,三價鐵不亞鐵化鉀反應,生成一種丌溶解的藍色化合物即三價鐵的亞鐵青化物。

            Leagene  普魯士藍染色用于顯示局部組織內(nèi)的各種出血性病變,常見于吞噬細胞內(nèi),

            可以很好地區(qū)分含鐵血黃素不其他色素。該染色液穩(wěn)定性好、可以長期保存、丌易產(chǎn)生沉淀、

            應用范圍廣,可以進行復染。該染色液的復染液采用核固紅,是zui經(jīng)典、zui常用的復染液。

            產(chǎn)品組成:

            名稱

            2×50ml     2×100ml

            試劑(A):

            A1: Perls stain A

            25ml

            25ml

            50ml

            50ml

            RT

            RT

            Perls stainB   A2: Perls stain  

            臨用前,取 A1A2 等量混合即為 Perls stain,丌宜提前配制。

            試劑(B):  核固紅染色液

            50ml

            100ml

            RT  避光

            使用說明書

             份

            自備材料:

            1、固定液:10%中性福爾馬林、4%多聚甲醛等

            2、系列乙醇

            操作步驟(僅供參考)

            ()石蠟切片染色:

            1、組織固定于 10%中性福爾馬林,常規(guī)脫水包埋。

            2、切片厚度 4μm,常規(guī)脫蠟至水。

            3、蒸餾水水洗 1min。

            4、切片入 Perls stain(見注意事項 2),浸染 1530min。

            5、蒸餾水充分沖洗 25min。

            6、入核固紅染色液,淡染細胞核 510min

            7、自來水沖洗 15s

            8、常規(guī)脫水透明,中性樹膠封固

            ()冰凍切片染色

            1、無需脫蠟,直接迅速用蒸餾水沖洗 23min。

            2、染色、脫蠟、透明、封固步驟同石蠟切片的染色步驟,時間可以相應縮短。

            ()細胞染色

            1、4%多聚甲醛固定 1020min

            2、自來水沖洗 次,每次 2min

            3、蒸餾水沖洗 次,每次 2min

            4、染色、脫蠟、透明、封固步驟同石蠟切片的染色步驟,時間可以相應縮短。

            染色結(jié)果:

            含鐵血黃素或三價鐵

            細胞核、其他組織

            藍色

            紅色

            陰性對照(可選)

            取相同切片脫蠟至水。入 5%草酸孵育 26h,經(jīng) Perls stain,其余步驟同上。結(jié)果為陰性。

            注意事項:

            1、 切片脫蠟應盡量干凈。組織固定常采用  10%中性福爾馬林,經(jīng)普通福爾馬林長期固定

            后,組織會有損傷。避免使用酸性固定劑,鉻酸鹽處理也會妨礙鐵的保存。

            2、 整個操作過程中容器要干凈,避免用金屬鐵制品,洗切片和容器時以蒸餾水為宜,因普

            通水內(nèi)含鐵質(zhì)。Perls stain  染色時,應根據(jù)樣本情況調(diào)整著色時間。

            3、 所有切片都應使用同一個陽性對照切片,選擇適合的對照非常重要。尸檢肺組織是一個

            很好的對照,包含相當數(shù)量的鐵陽性巨噬細胞(心衰細胞)

            4、 冰凍切片和細胞染色,根據(jù)具體情況摸索實驗條件。

            有效期:  12  個月有效。

            相關(guān)產(chǎn)品:

            產(chǎn)品編號

            DC0032

            DM0007

            TC1213

            產(chǎn)品名稱

            Masson三色染色液

            瑞氏-姬姆薩復合染色液

            總膽固醇(TC)檢測試劑盒  (COD-PAP單試劑比色法 )

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