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            CANDOR LowCross-Buffer®產(chǎn)品指導(dǎo)

            2013-12-3  閱讀(4109)

            分享:

            問題一:

            在過氧化物標(biāo)記的雙夾心elisa實驗中得到的背景值較高,原因是什么?LowCross-Buffer®能起到什么作用嗎?

            答復(fù):

            了解二抗能否與其他哺乳動物的抗體結(jié)合是非常重要的。除非是高度純化的抗體,抗兔lgG的二抗也能夠與鼠lgG,山羊lgG結(jié)合,原因是哺乳動物抗體的高 度同源性,不經(jīng)過純化(預(yù)吸附)的二抗可以與其他抗體進行高親和性的交叉反應(yīng),這種情況下,LowCross-Buffer起不到作用,二抗必須不能與捕 獲抗體結(jié)合,例如,Biotrend可以提供各類避免此類交叉反應(yīng)的預(yù)吸附抗體。

            問題二:

            我需要對LowCross-Buffer®進行稀釋嗎?

            答復(fù):

            是即用型的。樣品或檢測抗體直接用此稀釋,僅僅在競爭性實驗或一些免疫組化實驗中,可以用水或一些生理緩沖液對其進行稀釋。在這種情況下,實驗者要通過測試找到合適的比例。

            問題三:

            LowCross-Buffer®會對酶標(biāo)檢測的顯色反應(yīng)產(chǎn)生影響嗎?

            答復(fù):

            LowCross-Buffer®不會使堿性磷酸酶或過氧化物酶活性減弱。

            有的用戶把酶標(biāo)檢測抗體在LowCross-Buffer®孵育后會檢測到酶活性的增強。

             

            問題四:

            LowCross Buffer®能用在熒光物質(zhì)結(jié)合物中嗎?比如在蛋白芯片實驗中。

            答復(fù):

            是的,可以用在蛋白芯片中。對于青染料(如Cy5, Cy3,),有的實驗中可觀察到熒光量的增強。

             

            問題五:

            可以用于抗體或多克隆抗體嗎

            答復(fù):

            可以,不過在使用多抗時,要注意到多抗中含有親和力不同的多種抗體,LowCross-Buffer®僅允許高親和性的抗體結(jié)合而消除低親和性的結(jié)合。使 用LowCross-Buffer®時可適當(dāng)增加多抗的濃度,因為抗體濃度的增加也是高親和性抗體濃度的增加,同時LowCross-Buffer®抑制 低親和性結(jié)合。但是不是要加大抗體的濃度還要取決于抗體的純度。

            問題六:

            LowCross-Buffer®可以反復(fù)凍融嗎?

            答復(fù):

            反復(fù)凍融幾次不會有影響,但是在使用前要充分混勻。

            問題七:

            為什么LowCross-Buffer®能減少交叉反應(yīng)?

            答復(fù):

            我們所說的基質(zhì)效應(yīng)一般是一些基質(zhì)成分(如人血清標(biāo)本中的血清蛋白)的與分析物或抗體的低親和性結(jié)合。分析物會被標(biāo)本中的蛋白或其他成分掩蔽掉而不能與抗體結(jié)合,抗體也可以被基質(zhì)掩蔽。LowCross-Buffer®可以減少基質(zhì)對抗體的掩蔽。

             

            問題八:

            LowCross-Buffer®可以用在哪些方面?

            答復(fù):LowCross-Buffer®是一種新的用于免疫實驗(如ELISA、WB、蛋白芯片和免疫-PCR)的樣本緩沖液,有助于減少干擾作用,如非特異性結(jié)合,交叉反應(yīng)和基質(zhì)效應(yīng),抗原抗體的高親和結(jié)合不會被減弱。

            問題九

            LowCross-Buffer®能替代表面封閉液嗎?

            答復(fù):

            不行,LowCross-Buffer®不是表面封閉液,你可以用它稀釋樣本和抗體,我們推薦使用CANDOR的封閉液,能起到很好的封閉作用。 

             

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