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上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司
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| Cygnus產(chǎn)品及應(yīng)用選擇指南 : | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 部分藥品來源于生物組織，但產(chǎn)量有限，所以其價(jià)格十分昂貴。微生物/細(xì)胞生長迅速，容易控制，適于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。利用基因工程將合成相應(yīng)藥物成分的基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)，讓其產(chǎn)生相應(yīng)的藥物，不但能解決產(chǎn)量問題，還能大大降低生產(chǎn)成本。 基因工程圖
基因工程大大改變了現(xiàn)有制藥生產(chǎn)的狀況，但是基因工程產(chǎn)品中殘留的宿主細(xì)胞蛋白是影響制品純度的重要因素,反復(fù)使用含宿主細(xì)胞蛋白的基因工程制品有可能引起機(jī)體的過敏反應(yīng)。目前應(yīng)用于人類疾病治療或疾病預(yù)防的基因工程主要采用中國倉鼠卵巢細(xì)胞（CHO）作為宿主細(xì)胞。因制品中細(xì)胞蛋白殘留量低 ,用常規(guī)的理化方法無法檢測,為此需要建立細(xì)胞蛋白殘留量測定方法,對半成品進(jìn)行檢定,從而更有效地保證制品的質(zhì)量 ,提高制品的安全性。 Cygnus technologies, Inc.是美國一家專門從事生物工程和制藥過程中殘留物檢測的一系列產(chǎn)品。生物制品生產(chǎn)過程中存在許多影響產(chǎn)品質(zhì)量的殘留物，諸如特殊重組表達(dá)系統(tǒng)中宿主細(xì)胞蛋白（ Host Cell protein, HCP ）的殘留以及生物制品加工過程中培養(yǎng)物殘留的污染物。公司提供了廣泛而靈敏度*的一系列用于檢測生物工程殘留物的產(chǎn)品， Cygnus公司檢測產(chǎn)品覆蓋了常用于基因工程的培養(yǎng)細(xì)胞以及一些用于細(xì)胞培養(yǎng)的添加物。CHO細(xì)胞即中國倉鼠卵巢細(xì)胞（Chinese hamster ovary），該細(xì)胞具有不死性，可以傳代百代以上，是目前生物工程上廣泛培養(yǎng)的細(xì)胞。*批準(zhǔn)正式應(yīng)用于人類疾病治療或疾病預(yù)防的基因工程產(chǎn)品約有三十多種，其中只有一種（乙肝疫苗）是由酵母菌生產(chǎn)的，其余所有產(chǎn)品都是由CHO細(xì)胞和大腸桿菌生產(chǎn)的，大腸桿菌不能形成有活性的二聚體（如白介素2），也不具有糖基化的功能（如EPO），而CHO卻具有如上的功能，因此CHO成為表達(dá)復(fù)雜生物大分子的理想宿主。另外CH0細(xì)胞在基因工程使用中還有一個優(yōu)點(diǎn)，該細(xì)胞屬于成纖維細(xì)胞（fibroblast），是一種非分泌型細(xì)胞，它本身很少分泌CHO內(nèi)源蛋白，因而檢測起來很困難。  一、 Cygnus Elisa檢測產(chǎn)品 共有39種Elisa 檢測試劑盒，包括原核、真核表達(dá)細(xì)胞宿主蛋白檢測試劑盒，細(xì)胞培養(yǎng)殘留物檢測試劑盒等。 公司產(chǎn)品：
1.CHO HCP ELISA kit（F015） zui常用的用于檢測中國倉鼠卵巢細(xì)胞宿主蛋白試劑盒。 1）CHO HCP ELISA kit（F015）盒子組成
2）操作流程（中文操作流程僅供參考，實(shí)驗(yàn)請參照原裝英文說明書）
客戶可以根據(jù)檢測靈敏度的需要，選擇其中一種檢測方法。
兩種操作方法的比較：
2. E.coli HCP ELISA kit（F410） 針對利用E.coli生產(chǎn)相關(guān)藥物的客戶，檢測大腸桿菌宿主蛋白殘留物的利器。 1）E.coli HCP ELISA kit（F410）盒子組成
2）操作流程（中文操作流程僅供參考，實(shí)驗(yàn)請參照原裝英文說明書）
3. Pichia pastoris HCP ELISA kit（F140） 真核表達(dá)系統(tǒng)（畢赤酵母）宿主細(xì)胞殘留物檢測試劑盒。 1）Pichia pastoris HCP ELISA kit盒子組成
2）兩種不同的操作流程
兩種操作方法的比較：
4. BSA ELISA kit （F030） 細(xì)胞培養(yǎng)添加物BSA的檢測試劑盒。 1）BSA ELISA kit （F030）盒子組成
2）操作步驟
5. Protein A的檢測試劑盒 針對開發(fā)抗體藥，檢測純化過程中殘留的Protein A，也有其他相關(guān)應(yīng)用，分為三款F050、F050H和F400，其中F400是產(chǎn)品，是靈敏度zui高、效果的檢測Protein A的試劑盒。 1）三個試劑盒的組成
2）三個試劑盒的差別
二、Cygnus WB檢測產(chǎn)品 WB也是檢測宿主細(xì)胞蛋白的手段，Cygnus的WB kits里的抗體跟相應(yīng)的Elisa Kits是一樣的，WB kits里面包括酶標(biāo)抗體、陽性抗原、酶底物和封閉濃縮液，Cygnus的WB產(chǎn)品共有11種。具體產(chǎn)品可以參照下列（http://www.cygnustechnologies.com/category/western-blot-kits.html ） 部分WB產(chǎn)品：
三、 Cygnus免疫學(xué)產(chǎn)品 免疫學(xué)產(chǎn)品全部是Elisa和WB盒子里面的相關(guān)產(chǎn)品，提供抗體、抗原濃縮液（對照/標(biāo)準(zhǔn)品）、緩沖液和洗滌液等。 大部分抗體為山羊和兔來源，偶有豬抗，抗體貨號有前后綴，不同后綴代表的意思不同。Cygnus抗體共有117種，眾多抗體產(chǎn)品參照下列*：http://www.cygnustechnologies.com/category/antibodies.html 抗體的前綴/后綴代表的意義： PA或者PG是IgG片段 AF是親和純化的抗體 AF-AP偶聯(lián)了AP的親和純化抗體 AF-B偶聯(lián)了生物素的親和純化抗體 AF-HRP是偶聯(lián)了HRP的親和純化抗體 下面為部分抗體產(chǎn)品：
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