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BioGenes 中文介紹
點擊次數(shù)：2838 發(fā)布時間：2016-2-1
BioGenes—新一代宿主細胞殘留蛋白（HCP）ELISA檢測試劑盒
準(zhǔn)確定量檢測殘留的宿主細胞殘留蛋白（HCP）是病毒性疫苗或基因工程產(chǎn)品生產(chǎn)的關(guān)鍵質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)。BioGenes公司優(yōu)化的360 - HCP檢測試劑盒檢測宿主細胞蛋白(HCP)比傳統(tǒng)檢測具有顯著的優(yōu)勢。通過提供四個試劑盒包（每個包使用不同的anti-HCP抗體），通過比較選取zui適檢測試劑盒檢測HCP，增加了HCP檢出的特異性和靈敏度。因此可zui大限度的減少了anti-HCP抗體不能*檢測終產(chǎn)品中HCP的可能性。而傳統(tǒng)的HCP檢測只是使用一個抗體進行檢測，因此增加了部分HCP不能檢出的可能性。
BioGenes產(chǎn)品說明書：
1、CHO|360-HCP ELISA
CHO|360-HCP ELISA是為中國倉鼠卵巢細胞（CHO）作為宿主細胞的生物制品進行HCP檢測的試劑盒，擁有高度特異性和靈敏度，覆蓋率更多的CHO蛋白譜。
通過用模擬轉(zhuǎn)染CHO-K1和 CHO-S細胞的HCP免疫家兔或山羊，然后結(jié)合BioGenes公司*的抗原和抗體制備技術(shù)（優(yōu)化的蛋白純化技術(shù)）得到HCP多克隆抗體。使用事先準(zhǔn)備好的不同抗原（總HCP或分級HCP）每個分級HCP分別用于免疫動物，因而得到四個不同HCP ELISA檢測試劑盒(A到D)，這四個試劑盒共同組成360 - HCPHCP ELISA檢測體系。
HCP超級檢出率：
CHO|360-HCP ELISA試劑盒經(jīng)大量的模擬CHO-HCP樣本檢測測試。在大多數(shù)情況下可以從四個檢測試劑盒中找出*的HCP檢出率的試劑盒。如上圖樣本4可以看出，D型試劑盒可以檢出大于90%的HCP，比ABC三種類型更為適用于該樣本，而普通商業(yè)化的檢測試劑盒只能檢出約20%的HCP。
更高的檢測特異性：
LOD：0.5 – 1.0 ng/mL
LOQ ：2 – 3 ng/mL
檢出范圍：2 – 100 ng/mL
2、E.coli|360-HCP ELISA
E.coli |360-HCP ELISA是為大腸桿菌（E.coli）作為宿主細胞的生物制品進行HCP檢測的試劑盒，擁有高度特異性和靈敏度，覆蓋率更多的E.coli蛋白譜。
E.coli|360-HCP Assay試劑盒是利用在不同培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件下發(fā)酵的W3110和BL21(DE3) 細胞株產(chǎn)生四種具有不同HCP蛋白譜的抗原。然后用這四種抗原免疫山羊得到四種不同的HCP ELISAs試劑盒(A到D)，四者共同構(gòu)成E.coli|360-HCP Assay 檢測體系。可通過考馬斯染色E.coli的 HCP和不同抗體的2D western blotting 檢測確定zui高特異性的試劑盒。
HCP超級檢出率：
E.coli |360-HCP ELISA試劑盒經(jīng)大量的模擬大腸桿菌-HCP樣本檢測測試。如上圖可以看出，可以看出，B型試劑盒可以檢出樣本1中大于 80%的HCP，A型試劑盒是樣本2和3的*檢測試劑盒，而樣本5的*檢測試劑盒是D型試劑盒。
更高的檢測特異性：
LOD：0.5 – 1.0 ng/mL
LOQ ：2 – 3 ng/mL
檢出范圍：2 – 100 ng/mL
3、*試劑盒選擇的方法：
如實驗中選取中國倉鼠卵巢細胞（CHO）作為宿主細胞，則選擇CHO|360-HCP ELISA試劑盒進行HCP檢測；如實驗中選取大腸桿菌（E.coli）作為宿主細胞，則選擇E.coli |360-HCP ELISA試劑盒進行HCP檢測。然后根據(jù)以下方法對具體的試劑盒型號進行選擇。
（1）預(yù)實驗選取法：
該方法是采用The 360-HCP ELISAs Starter Set包（內(nèi)含A-D型四種不同的檢測試劑盒），通過預(yù)實驗選取zui適試劑盒類型進行后續(xù)實驗。實驗流程如下圖：
（2）BioGenes公司鑒定服務(wù)推薦法
除上述客戶自行確定*試劑盒法外，BioGenes還提供試劑盒性能試驗并推薦*試劑盒的服務(wù)。
方法1：
360-HCP ELISA kits (type A to D)檢測含HCP樣本，流程為:
（1）客戶提供4-8個不同純化階段的樣本；
（2）兩次重復(fù)實驗進行確定；
（3）每個樣品多達4個稀釋倍數(shù)；
（4）BioGenes推薦一個*的ELISA檢測試劑盒類型，同時附一個簡短的推薦報告。
方法2：
2-D蛋白印記分析模擬的HCP：2-D蛋白印記分析可以獲得抗HCP抗體對存在于宿主細胞株中全部HCP的范圍評估信息，以獲取確信的zui適抗體類型和水平，流程為:
（1）2-D 分離和考馬斯藍銀染色和銀染；
（2）使用不同抗體稀釋度進行免疫印跡；
（3）完成包括蛋白范圍的報告；
（4）推薦zui適ELISA檢測試劑盒類型，同時附一個簡短的推薦報告。