為方便廣大用戶使用，試劑內(nèi)容如下：

羊外周血淋巴細(xì)胞分離液說明書【實驗前準(zhǔn)備】
A．適用儀器
zui大離心力可達1200g的水平轉(zhuǎn)子離心機
B．耗材

羊外周血淋巴細(xì)胞分離液說明書【檢驗方法】
全過程樣本、試劑及實驗環(huán)境均需在20±2℃的條件下進行。
首先取抗凝血按體積比 1:1的比例與樣本稀釋液（產(chǎn)品編號：2010C1119）混勻，根據(jù)
稀釋后的樣本量大小，分以下兩種情況：
情況 A：稀釋后的血液樣本量小于 5ml時，實驗方法如下：
1.取一支15ml離心管，先加入與稀釋后樣本等量的分離液（注：分離液zui少不得少于  3ml）。
2.用吸管小心吸取稀釋后的血液樣本加于分離液液面上，400-500g，離心20-30min（注：
根據(jù)血液樣本量確定離心條件，血液樣本量越多，離心力越大，離心時間越長，具體離
心條件需客戶自行摸索，以達到分離效果）。
3.離心后，此時離心管中由上至下分為四層。*層為血漿層。第二層為環(huán)狀乳白色淋巴
細(xì)胞層。第三層為透明分離液層。第四層為紅細(xì)胞層。
4.用吸管小心吸取第二層環(huán)狀乳白色淋巴細(xì)胞層到另一15ml離心管中，往所得離心管中
加入10ml清洗液（產(chǎn)品編號：2010X1118），混勻細(xì)胞。
5. 250g，離心 10min。
6.棄上清。
7.用吸管以5ml清洗液（產(chǎn)品編號：2010X1118）重懸所得細(xì)胞。
8. 250g，離心 10min。
9.重復(fù)6、7、8，棄上清后以 0.5ml后續(xù)實驗所需相應(yīng)液體重懸細(xì)胞。
情況 B：稀釋后的血液樣本量大于等于5ml時，實驗方法如下：
1.取一支適當(dāng)?shù)碾x心管，先加入與稀釋后樣本等量的分離液。
2.將經(jīng)稀釋后的血液樣本小心加于分離液之液面上，550-650g（zui大離心力可至1000g），
離心20-30min。（注：根據(jù)血液樣本量確定離心條件，血液量越多，離心力越大，離心
時間越長，具體離心條件需客戶自行摸索，以達到分離效果。加入血液樣本后，樣
本及分離液總體積不得超過離心管總體積的三分之二）。
3.剩余步驟同“情況A”中步驟 3至步驟  9。
【注意事項】
1.全過程樣本、試劑及實驗環(huán)境均需在20±2℃的條件下進行。為獲得的實驗結(jié)果，zui
好在取血 2h內(nèi)進行實驗，血液存放時間越長，細(xì)胞分離效果越差。血液放置超過6h后
分離效果更差甚至不能達到分離目的。
2.本實驗不要使用高聚合材質(zhì)（如聚苯乙烯）的塑料制品，應(yīng)使用無靜電、低靜電離
心管及未經(jīng)堿處理過后的玻璃制品，因為靜電作用將導(dǎo)致細(xì)胞貼壁、堿處理的玻璃表面
會變成毛面，影響細(xì)胞分離效果。
3.吸取過多的淋巴細(xì)胞層及分離液層會導(dǎo)致分離液交界處的粒細(xì)胞被吸出從而使混雜的粒
細(xì)胞數(shù)量增加。
4.吸取過多的淋巴細(xì)胞層上層溶液會導(dǎo)致血漿蛋白及血小板混雜。
5.如所實驗后細(xì)胞得率或活性過低，請上海研謹(jǐn)生物以尋求幫助。
羊外周血淋巴細(xì)胞分離液說明書【儲存條件及有效期】
18-25℃保存，有效期 2年。本品易感染細(xì)菌，需無菌條件操作。無菌條件下操作，啟
封后置常溫保存。如 4℃保存，本分離液易出現(xiàn)白色結(jié)晶，影響分離效果。
【參考值（參考范圍）】
本實驗淋巴細(xì)胞提取率及純度均大于80%。