因此，在測定ELISA試劑盒樣的同時，繪制校準曲線為理想，否則應(yīng)在測定試樣的同時，平行測定零濃度和中等濃度標(biāo)準溶液各兩份，取均值相減后與原校準曲線上的相應(yīng)點核對，其相對差值根據(jù)方法精密度不得大于5%~10%，否則應(yīng)重新繪制校準曲線。

       ELISA試劑盒校準曲線的繪制: 用一系列被測物標(biāo)準溶液，按照標(biāo)準方法規(guī)定的步驟，將被測物轉(zhuǎn)變?yōu)橛猩芤?。制備好的?biāo)準系列和空白，在方法選定的波長下，測定吸光度。已被測物濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制校準曲線。1)對標(biāo)準系列，溶液以純?nèi)軇閰⒈冗M行測量后，應(yīng)先作空白校正，然后繪制標(biāo)準曲線;2)標(biāo)準溶液一般可直接測定，但如試樣的預(yù)處理較復(fù)雜致使污染或損失不可忽略時，應(yīng)和試樣同樣處理后再測定。 3)校準曲線的斜率常隨環(huán)境溫度、試劑批號和貯存時間等實驗條件的改變而變動。

       凡應(yīng)用校準曲線的分析方法，都是在樣品測得信號值后，從校準曲線上查得其含量(或濃度)。因此，繪制準確的校準曲線，直接影響到樣品分析結(jié)果的準確與否。此外，ELISA試劑盒校準曲線也確定了方法的測定范圍。

【注意事項】

1、ELISA試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2、濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。

3、各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

4、請每次測定的同時做標(biāo)準曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準品孔一孔的OD值)，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定，計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

5、封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6、底物請避光保存。

7、嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準.

8、所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

9、本試劑不同批號組分不得混用。