pUC-T TA載體是一種克隆PCR產(chǎn)物的載體，它是由pUC18載體在EcoR V
酶切位點(diǎn)處切開(kāi)，在兩側(cè)的3′端添加T而成。由于大部分耐熱聚合酶反應(yīng)時(shí)都會(huì)

在 PCR產(chǎn)物的3′端添加一個(gè)A，它可以與pUC-T 3′端的T互補(bǔ)連接，因此可大大提高PCR

產(chǎn)物的連接和克隆效率。
　　試劑盒中配備率的T4 DNA Ligase和為快速DNA連接優(yōu)化的2×Quick

Ligation eaction Buffer。連接效率相當(dāng)于用T4 DNA Ligase 進(jìn)行常規(guī)連接1小時(shí)。帶有

插入片段的重組子可根據(jù)α互補(bǔ)原理，進(jìn)行藍(lán)白斑篩選，判斷載體中有無(wú)外源基因的插

入?？寺『罂梢杂肂caBEST Sequencing Primers和 M13通用引物對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序。