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腫瘤標(biāo)志物檢測的影響因素和質(zhì)量控制
㈠ 分析前
1. 標(biāo)本的采集。血液標(biāo)本的正確采集和保存是腫瘤標(biāo)志物測定結(jié)果準(zhǔn)確的重要保證。如前列腺按摩、前列腺穿刺、射精、 導(dǎo)尿和直腸鏡檢查后，血液 PSA 和PAP 值可升高；肝、腎功能異常和膽道排泄不暢、膽汁淤滯等均可造成腫瘤標(biāo)志物如 CEA 、 ALP 、 GGT 、細(xì)胞因子等濃度增高；某些藥物會(huì)影響腫瘤標(biāo)志物的濃度，如抗雄激素治療前列腺癌時(shí)可抑制 PSA 產(chǎn)生，導(dǎo)致PSA假陰性結(jié)果； 唾液和汗液污染標(biāo)本可使SCC 升高。
由于紅細(xì)胞和血小板中也存在神經(jīng)元特異性烯醇化酶（ NSE ），因此，樣本溶血可使血液中 NSE 濃度 增高。試管內(nèi)的促凝劑，對某些項(xiàng)目的測定有干擾。
2. 標(biāo)本的保存。血液標(biāo)本采集后應(yīng)及時(shí)離心，保存 於 4 ℃ 冰箱中， 24 小時(shí)內(nèi)測定；如在短期內(nèi)測定，則應(yīng) -20 ℃ 保存，長期保存應(yīng)置-70 ℃ 冰箱 , 標(biāo)本應(yīng)防止反復(fù)凍融。酶類和激素類腫瘤標(biāo)志物不穩(wěn)定，易降解，應(yīng)及時(shí)測定或低溫保存。
㈡ 分析中
1. 測定方法和試劑對檢測結(jié)果的影響：
從方法學(xué)來看，腫瘤標(biāo)志物測定方法很多，有放射免疫測定法，酶聯(lián)免疫測定法，化學(xué)發(fā)光免疫測定法等，每種測定方法有自己的精密度和重復(fù)性，但手工操作的方法重復(fù)性較差，誤差比較大，操作時(shí)要特別認(rèn)真；用自動(dòng)化儀器進(jìn)行測定，重復(fù)性好，誤差小。

不同的試劑盒測定也有差異 ,其原因可能是由于使用的單克隆抗體針對抗原的位點(diǎn)不同所致。有時(shí)即使使用同一抗體，也可能因抗原異質(zhì)性（如原發(fā)腫瘤轉(zhuǎn)移后，失去了原有的抗原性而停止分泌原有的腫瘤抗原）或基質(zhì)的影響而得到不同的結(jié)果。有研究報(bào)道，使用12 種不同的 CEA 試劑盒檢測某一混合血清中 CEA 的濃度，結(jié)果其差異超過 100%。導(dǎo)致分析間誤差的主要原因是沒有測定的標(biāo)準(zhǔn)化，包括缺乏統(tǒng)一的抗原、抗原成分、校和參考方法等。因此，在工作中要盡量使用同一種方法，同一種儀器和同一廠家的試劑盒進(jìn)行測定。

2. “鉤狀效應(yīng)”對檢測結(jié)果的影響： 腫瘤標(biāo)志物的范圍常涵蓋幾個(gè)數(shù)量級，“鉤狀效應(yīng)”可將高濃度結(jié)果錯(cuò)誤報(bào)告為低濃度。酶聯(lián)免疫測定或免疫放射測定時(shí)，若待測樣本中抗原濃度過高，會(huì)出現(xiàn)高濃度后帶現(xiàn)象，即“鉤狀效應(yīng)”（ hook effect），此時(shí)免疫反應(yīng)被明顯抑制，出現(xiàn)錯(cuò)誤的低值，要消除這種干擾，只有對樣本進(jìn)行適當(dāng)稀釋后重新測定。
3. 交叉污染對檢測結(jié)果的影響： 當(dāng)測定很高濃度的標(biāo)本時(shí)，交叉污染成為一個(gè)導(dǎo)致假陽性的潛在問題，所以應(yīng)不時(shí)地復(fù)查有無標(biāo)本被交叉污染。
4.嗜異性抗體對檢測結(jié)果的影響： 大多數(shù)腫瘤標(biāo)志物的測定中常使用一對鼠單克隆抗體來與腫瘤抗原反應(yīng)，如果病人血清中存在嗜異性抗體（特別是人抗鼠抗體），它可能在兩種鼠單克隆抗體間起“橋梁”作用，導(dǎo)致在無抗原的情況下，出現(xiàn)腫瘤標(biāo)志物濃度增高的假象。避免的辦法是在樣本中先加入提純的鼠 IgG，經(jīng)溫育后，再用 PEG 沉淀鼠 IgG 和人抗鼠 IgG復(fù)合物，然后再進(jìn)行測定。嗜異性抗體可出現(xiàn)在曾被鼠或?qū)櫸镆н^的人，以及使用過動(dòng)物免疫劑（如單克隆抗體）治療過的人。
5 腫瘤標(biāo)志物檢測的質(zhì)量控制
⑴ 檢測結(jié)果的重復(fù)性要求：常規(guī)腫瘤標(biāo)志物測定的變異系數(shù)，批內(nèi) CV<5% ， 批間 CV<10% （ 期望值 ） 。
⑵ 室內(nèi)質(zhì)控標(biāo)本的要求：室內(nèi)質(zhì)控應(yīng)包括陰性和陽性低值和高值質(zhì)控血清，要能涵蓋腫瘤標(biāo)志物測定的范圍 。
⑶ 室內(nèi)質(zhì)控品要求：以血清為基質(zhì)。
⑷ 室內(nèi)質(zhì)控圖：腫瘤標(biāo)志物很少有參考方法，要堅(jiān)持作室內(nèi)質(zhì)控圖，以均值為靶值，來判斷試驗(yàn)的穩(wěn)定性和重復(fù)性。
㈢ 分析后：
1 ．參考值范圍， 不同標(biāo)本如血液、尿液、胸、腹水等，必須有不同的參考值。不同地區(qū)、不同人群、不同方法、不同試劑和設(shè)備應(yīng)建立自己的參考值范圍。
2 ．病人基礎(chǔ) 測定 值的變化， 對于結(jié)果的 分析極 有價(jià)值。故應(yīng)監(jiān)測病人治療前、治療中和治療后各個(gè)階段腫瘤標(biāo)志物含量 的變化，好畫一張腫瘤標(biāo)志物含量的變化的曲線圖，以便綜合分析。
3 ．上升或下降 25 ％的臨床意義，一般病人的結(jié)果在排除檢測方法引起的誤差后，上升或下降 25 ％都有臨床價(jià)值。對于測定結(jié)果升高的標(biāo)本必須復(fù)查，以防測定誤差。
4 ．加強(qiáng)與臨床的交流和溝通， 由于 腫瘤標(biāo)志物測定其臨床意義的特殊性，必須加強(qiáng)與臨床的交流和溝通，當(dāng)改變腫瘤標(biāo)志物檢測方法和試劑時(shí)，必須通知臨床，否則會(huì)影響結(jié)果的判斷。建議醫(yī)師開化驗(yàn)單時(shí)提供簡短的病人信息，如“手術(shù)后 ”“化療 3 次后 ” 等，這對解釋結(jié)果非常重要，還可幫助我們發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室的偶然差錯(cuò)。
5 ．必須知道腫瘤標(biāo)志物的半壽期， 這有助解釋某些腫瘤標(biāo)志物，如 AFP 和 hCG 的濃度變化，對于臨床判斷療效有重要意義。