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            首頁   >>   技術(shù)文章   >>   熒光分光光度計(jì)測(cè)量熒光強(qiáng)度為什么要設(shè)定兩個(gè)波長(zhǎng)？
            
		
            
	
            
        
            
        
            
	
            
				
            
					
            
						
            
						
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            熒光分光光度計(jì)測(cè)量熒光強(qiáng)度為什么要設(shè)定兩個(gè)波長(zhǎng)？
            
        			
            閱讀：12578      發(fā)布時(shí)間：2021-7-27
        				
            
							
				
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              　　熒光分光光度計(jì)使用的時(shí)候存在兩種模式，一種是固定Ex掃Em，一種是固定Em掃Ex，將一個(gè)范圍的Ex（如230nm~300nm）的ex所對(duì)應(yīng)的Em組合起來就是3D熒光。簡(jiǎn)單的說，Ex是激發(fā)，也就是手電筒（光源），固定Ex的意思就是只用某個(gè)波長(zhǎng)，如254nm作為光源來激發(fā)樣品，觀察的是固定該光源時(shí)，樣品在不同波長(zhǎng)位置所展現(xiàn)的熒光強(qiáng)度（即em），簡(jiǎn)單的說，就是看光屏上的強(qiáng)度。這一模式是為了了解待測(cè)物在哪個(gè)波段有光致發(fā)光現(xiàn)象。而Em，也就是被激發(fā)的光（就是接收器上接收到的），這是在知道了我的樣品在哪一個(gè)位置發(fā)光（被激發(fā)后發(fā)光）后，或者說，選定一個(gè)我需要的發(fā)光位置后，看看哪一個(gè)波長(zhǎng)的光源對(duì)樣品激發(fā)效果更好。
             
            　　一個(gè)是激發(fā)波長(zhǎng)，另一個(gè)是發(fā)射波長(zhǎng)。你得到一個(gè)新的樣品，你不知道它的激發(fā)波長(zhǎng)，發(fā)射波長(zhǎng)，那么辦呢。在前輩總結(jié)下，熒光分光光度計(jì)發(fā)現(xiàn)樣品的發(fā)射波長(zhǎng)波動(dòng)小，所以先確定發(fā)射波長(zhǎng)。沒有激發(fā)波長(zhǎng)激發(fā)，發(fā)射波長(zhǎng)也得不到。一般熒光樣品的激發(fā)波長(zhǎng)在300-410nm之間，你們可以查看同類物質(zhì)的激發(fā)波長(zhǎng)是多少，總結(jié)一下，在300—410nm中，先確定一個(gè)激發(fā)波長(zhǎng)。在激發(fā)波長(zhǎng)的激發(fā)下，出現(xiàn)熒光強(qiáng)度變化圖譜，熒光強(qiáng)度最大的那個(gè)點(diǎn)所對(duì)應(yīng)的發(fā)射波長(zhǎng)，即圖的橫坐標(biāo)上的值，為發(fā)射波長(zhǎng)。以發(fā)射波長(zhǎng)確定最佳激發(fā)波長(zhǎng)原則，熒光分光光度計(jì)以上面的發(fā)射波長(zhǎng)為激發(fā)波長(zhǎng)，再次得到一個(gè)光譜圖。在光譜圖中，同樣有一個(gè)最大熒光強(qiáng)度，這個(gè)強(qiáng)度所對(duì)應(yīng)的發(fā)射波長(zhǎng)就是你要找的最佳激發(fā)波長(zhǎng)。所以會(huì)有兩條圖線，就有兩個(gè)波長(zhǎng)。
            
        		
            
        		
			
            
        
            
    
            
	 		 
	
            
		
            
			
            
				
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