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Hamilton 陰離子交換柱的使用規(guī)則
在使用Hamilton 陰離子交換柱之前,你要充分地熟悉Hamilton 陰離子交換柱的使用規(guī)則。
1.簡介
柱填充硅膠基質的強陰離子交換材料,含有季胺功能團。特別設計用于使用常規(guī)HPLC分析有機和無機陰離子。
2.洗脫液
推薦在這類柱上使用的洗脫液要求低電導,或者UV吸收的緩沖液,例如磷酸緩沖液,pH范圍從2.5到6.5。
不能使用水楊酸緩沖液,因為水楊酸分解產物會改變固定相的性質。另外,硝酸銨(1mM)可以改善峰型,而且不會明顯影響保留時間,檢測或定量結果。
洗脫液在使用以前要脫氣,并用0.45微米濾膜過濾,防止發(fā)生檢測和泵送問題。
一定要在開始使用系統(tǒng)以前檢查有否微生物生長,否則你的柱子會堵塞,柱壓會升高到無法接受的水平。
3.色譜柱老化
在開始分析工作以前,柱子必須經(jīng)過正確的老化。一個沒有正確老化的柱子可能會帶來問題,諸如很差的柱效或者分離情況發(fā)生變化等等。
要老化這類柱子,首先要使用甲醇淋洗,然后使用去離子水。再用你選用的洗脫液進行平衡。
在發(fā)貨以前,每根柱子都已經(jīng)測試過并進行了老化。因此沒有必要在*次使用時用水沖洗)。
4.樣品準備
保持柱子長壽的關鍵是進樣前適當?shù)牡臉悠诽幚怼Ｄ惚仨毞乐箤⑹杷?與流動相極性差別很大的化合物泵入色譜柱,不管是來自流動相還是樣品。特別地,要禁止導入顆粒雜質。這些zui終都會造成操作壓力的增高而且非常困難或者不可能去除。
5.流量和壓力
注意:zui高壓力:不銹鋼柱:4500psi;玻璃柱:3000psi
增加流速或者降低流速要采取小的間隔變化以防止填充床的擾動。
如果你想更換柱子,,要降低流量至0,等待洗脫液*流出柱子為止(2分鐘)。
拆除柱子而沒有等待壓力的降低會損壞柱子。
高柱壓的產生一般是由于不正確地使用柱子的結果。
使用保護柱(見第6節(jié))會防止污染物沉積在分析柱上。
6.保護柱
一定要使用保護柱,因為樣品和洗脫液污染可能會造成柱壓力的增高而且影響選擇性。對于ChromSep柱我們建議使用ChromSepAnion交換保護柱。當柱壓增高的或者觀察到柱效降低的時候就需要更換保護柱了。
7.進樣量和濃度
當樣品的洗提強度比洗脫液低(在柱樣品預濃縮)的時候,更高的樣品量也可以注射。
8.溫度
色譜柱可以在室溫環(huán)境使用。為了提高柱子的穩(wěn)定性,建議不要在40°C以上使用。
9.Hamilton 陰離子交換柱貯存
在貯存柱子以前,建議先用去離子水,然后用甲醇沖洗。一定不要在柱子內充滿緩沖液或者其他含鹽類的洗脫液的情況下貯存色譜柱。