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用STED顯納鏡定量顯示線粒體的動(dòng)態(tài)變化
光學(xué)STED顯納鏡能以納米級(jí)分辨率長(zhǎng)時(shí)間研究細(xì)胞內(nèi)的生理過程
本研究開發(fā)了一種增強(qiáng)型方酸變體染料（MitoESq-635），以超高分辨率方法研究活細(xì)胞中線粒體嵴的動(dòng)態(tài)結(jié)構(gòu)。對(duì)活體HeLa細(xì)胞中的線粒體內(nèi)膜進(jìn)行了超過50分鐘的延時(shí)成像（每幀3.9秒，間隔71.5秒），分辨率為35.2nm。可清楚地觀察到線粒體融合和裂變過程中線粒體嵴的形態(tài)和形狀。在與低功率STED結(jié)合使用的情況下，MitoESq-635的標(biāo)記特異性和性能使其非常適合作為線粒體長(zhǎng)期超高分辨率成像的下一代標(biāo)準(zhǔn)方法。
圖1：共焦顯微鏡（左）和STED顯納鏡（右）成像的比較。圖像中的綠色虛線所示的強(qiáng)度截面表明，用STED超高分辨率顯微鏡可獲得35.2nm的分辨率。比例尺為5µm。
圖2：線粒體的延時(shí)STED成像顯示了融合過程中線粒體嵴的動(dòng)態(tài)變化。線粒體發(fā)生了從線狀到氣泡狀的動(dòng)態(tài)變化。上面兩行的比例尺為2μm，下面一行的比例尺為1μm。