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紫外可見分光光度計(jì)測定方法
1.對照品比較法
按各品種項(xiàng)下的方法,分別配制供試品溶液和對照品溶液,對照品溶液中所含被測成分的量應(yīng)為供試品溶液中被測成分規(guī)定量的100%土10% ,所用溶劑也應(yīng)*一致,在規(guī)定的波長測定供試品溶液和對照品溶液的吸光度后,按下式計(jì)算供試品中被測溶液的濃度
C = (AX/AR)CR
式中CX為供試品溶液的濃度;AX為供試品溶液的吸收度;
AR為對照品溶液的濃度;CR為對照品溶液的吸收度。
2.吸收系數(shù)法
按各品種項(xiàng)下的方法配制供試品溶液,在規(guī)定的波長處測定其吸光度,再以該品種在規(guī)定條件下的吸收系數(shù)計(jì)算含量。用本法測定時(shí),吸收系數(shù)通常應(yīng)大于100,并注意儀器的校正和檢定。
3.比色法
供試品溶液加入適量顯色劑后測定吸光度以測定其含量的方法為比色法。用比色法測定時(shí)，應(yīng)取數(shù)份梯度量的對照品溶液,用溶劑補(bǔ)充至同一體積,顯色后,以相應(yīng)試劑為空白,在各品種規(guī)定的波長處測定各份溶液的吸光度,以吸光度為縱坐標(biāo),濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,再根據(jù)供試品的吸光度在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得其相應(yīng)的濃度,并求出其含量。也可取對照品溶液與供試品溶液同時(shí)操作,顯色后,以相應(yīng)的試劑為空白,在各品種規(guī)定的波長處測定對照品和供試品溶液的吸光度。按上述方法計(jì)算供試品溶液的濃度。
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